[发明专利]适于转化细胞的载体、重组细胞及其用途

权利要求书

1.一组适于转化细胞的载体，其特征在于，包括：

第一载体，所述第一载体包含：

第一核酸序列，所述第一核酸序列包括编码报告蛋白的序列，所述报告蛋白具有可检测的活性；以及

二恶英响应区域，所述二恶英响应区域包含二恶英应答元件，并且所述二恶英响应区域与所述第一核酸序列可操作地连接，

第二载体，所述第二载体包含：

第二核酸序列，所述第二核酸序列包含编码芳香烃受体的序列，

任选地，所述细胞为小鼠肝癌细胞，

任选地，所述细胞为小鼠肝癌细胞Hepa1-6。

2.根据权利要求1所述的一组适于转化细胞的载体，其特征在于，所述报告蛋白为选自发光蛋白、荧光蛋白、酶的至少一种，

任选地，所述报告蛋白为绿色荧光蛋白、增强型绿色荧光蛋白以及荧光素酶的至少一种，

任选地，所述报告蛋白为增强型绿色荧光蛋白，

任选地，所述二恶英响应区域包含多个串联的二恶英应答元件，

任选地，所述二恶英应答元件具有如SEQ ID NO：1-7至少一项所示的核苷酸序列，

任选地，所述二恶英响应区域进一步包含第一启动子，所述第一启动子分别与所述二恶英应答元件和所述第一核酸序列可操作地相连，

任选地，所述第一启动子为CMV启动子或其功能等同体，

任选地，所述第一启动子具有如SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列，

任选地，所述第一载体进一步包含编码第一筛选标记基因的核酸序列，

任选地，所述第一筛选标记基因为选自编码发光蛋白的基因和药物抗性基因的至少一种，

优选地，所述药物抗性基因为选自新霉素磷酸转移酶和潮霉素B抗性基因的至少一种，

任选地，所述第二核酸序列具有如SEQ ID NO：9所示的核苷酸序列，

任选地，所述第二载体进一步包括第二启动子，所述第二启动子与所述第二核酸序列可操作地连接，

任选地，所述第二启动子为真核细胞启动子，

任选地，所述真核细胞启动子为选自CAG启动子和PGK启动子的至少一种，

任选地，所述第二载体进一步包含增强子序列，所述增强子序列与所述第二核酸序列可操作地连接，

任选地，所述第二载体进一步包含内含子序列，所述内含子序列与所述第二核酸序列可操作地连接，

任选地，所述第二载体进一步包括编码第二筛选标记基因的核酸序列，

任选地，所述第二筛选标记基因为选自编码发光蛋白的基因和药物抗性基因的至少一种，

任选地，所述第一筛选标记基因与所述第二筛选标记基因不同。

3.一种适于转化细胞的载体，其特征在于，包括：

第一核酸序列，所述第一核酸序列包括编码报告蛋白的序列，所述报告蛋白具有可检测的活性；以及

二恶英响应区域，所述二恶英响应区域包含二恶英应答元件，并且所述二恶英响应区域与所述第一核酸序列可操作地连接，

任选地，所述细胞为小鼠肝癌细胞，

任选地，所述细胞为小鼠肝癌细胞Hepa1-6，

任选地，所述报告蛋白为选自发光蛋白、荧光蛋白、酶的至少一种，

任选地，所述报告蛋白为绿色荧光蛋白、增强型绿色荧光蛋白以及荧光素酶的至少一种，

任选地，所述报告蛋白为增强型绿色荧光蛋白，

任选地，所述二恶英响应区域包含多个串联的二恶英应答元件，

任选地，所述二恶英应答元件具有如SEQ ID NO：1-7至少一项所示的核苷酸序列，

任选地，所述二恶英响应区域进一步包含第一启动子，所述第一启动子分别与所述二恶英应答元件和所述第一核酸序列可操作地相连，

任选地，所述第一启动子为CMV启动子或其功能等同体，

任选地，所述第一启动子具有如SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列，

任选地，所述第一载体进一步包含编码第一筛选标记基因的核酸序列，

任选地，所述第一筛选标记基因为选自编码发光蛋白的基因和药物抗性基因的至少一种，

任选地，所述药物抗性基因优选为选自新霉素磷酸转移酶和潮霉素B抗性基因的至少一种。