[发明专利]一种具有多氯联苯降解功能固氮蓝藻的分离筛选方法

权利要求书

1.一种具有多氯联苯降解功能固氮蓝藻的分离筛选方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

1)配置无氯培养基，加入琼脂糖后灭菌，待冷却至60℃加入多氯联苯，混合均匀后倒入分离筛选装置中相应的筛选区中，冷却固定，作为筛选藻种的固体培养基；

2)将采集至野外土壤中经过预培养的混合藻液进行离心分离，弃上清，用无氯培养基重悬细胞，混匀后得到所述混合藻液的浓缩液；

3)将步骤2)中得到的混合藻液的浓缩液倒入步骤1)中的固体培养基上；

4)将所述分离筛选装置于培养室恒温培养。

2.如权利要求1所述的一种具有多氯联苯降解功能固氮蓝藻的分离筛选方法，其特征在于：步骤1)中所述的无氯培养基中各物质的配方浓度为：硝酸钠1.5g/L，七水合硫酸镁0.075g/L，乙二胺四乙酸二钠0.001g/L，三水磷酸氢二钾0.04g/L，磷酸二氢钙0.057g/L，碳酸钠0.02g/L，柠檬酸0.006g/L，柠檬酸铁铵0.006g/L，A5溶液1mL/L。

3.如权利要求1所述的一种具有多氯联苯降解功能固氮蓝藻的分离筛选方法，其特征在于：步骤1)中所述的固体培养基的用量为10-70mL。

4.如权利要求1所述的一种具有多氯联苯降解功能固氮蓝藻的分离筛选方法，其特征在于：步骤1)中所述的培养基中琼脂糖含量为0.1-0.7g；所述多氯联苯的用量为0.01-0.35mg。

5.如权利要求1所述的一种具有多氯联苯降解功能固氮蓝藻的分离筛选方法，其特征在于：步骤2)中所述的预培养的混合藻液为1/2BG11培养基。

6.如权利要求1所述的一种具有多氯联苯降解功能固氮蓝藻的分离筛选方法，其特征在于：步骤2)中所述的混合藻液的浓缩液的细胞密度为2×10⁶-10⁷cells/mL。

7.如权利要求1～6之一所述的一种具有多氯联苯降解功能固氮蓝藻的分离筛选方法，其特征在于：步骤2)中所述的离心转速为2500-4500rpm，离心时间为10-30min。

8.如权利要求1所述的一种具有多氯联苯降解功能固氮蓝藻的分离筛选方法，其特征在于：步骤4)中：所述的恒温培养条件为：温度25℃，湿度70％，光照2000lux，光暗比1∶1。