[发明专利]一种中性漂白木聚糖酶的制备方法

权利要求书

1.一种中性漂白木聚糖酶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)以毕赤酵母为生产菌种，采用试管斜面活化，摇瓶放大培养的方式培养菌种；

2)将所述菌种接种至一级种子罐，罐压0.07～0.08Mpa，风量16～18m³/h，pH值自然，29～31℃培养15～20小时；

3)经检测所述一级种子罐放大培养的菌种湿重达到30～40g/L时转入二级种子罐，罐压0.07～0.08Mpa，风量180～200m³/h，pH值自然，29～31℃培养10～15小时；

4)经检测所述二级种子罐放大培养的菌种湿重达到30～40g/L时转入发酵罐，罐压0.07～0.08Mpa，初始风量为1000m³/h，培养5小时后风量开至最大，初始搅拌转速为140r/min，培养8小时后搅拌转速调为180～220r/min，在培养过程中补加氨水将pH值维持在5.5，菌体培养温度为29～31℃，当还原糖为0.1％～0.2％时，加入甲醇，温度调整为27～29℃，接种量5％～30％，发酵罐发酵培养周期为120～130小时；

5)停加所述甲醇，吹无菌空气2小时，开始出罐，出罐pH值为4.5～5.0。

2.如权利要求1所述的中性漂白木聚糖酶的制备方法，其特征在于，步骤2)中所述一级种子罐所用的培养基包括：葡萄糖5Kg，蛋白胨5Kg，酵母粉4Kg，磷酸二氢钾0.32Kg，硫酸铵0.36Kg，跑敌100ml，投料后加微量元素，定容至150L，pH4.5～5.0。

3.如权利要求1所述的中性漂白木聚糖酶的制备方法，其特征在于，步骤3)中所述的二级种子罐所用的培养基包括：葡萄糖30Kg，蛋白胨15Kg，磷酸二氢钾9Kg，硫酸铵9Kg，跑敌1Kg，投料后加微量元素，定容至1500L，pH4.8～5.3。

4.如权利要求1所述的中性漂白木聚糖酶的制备方法，其特征在于，步骤4)中所述的发酵罐所用的培养基包括：蛋白胨22Kg，磷酸二氢钾160Kg，硫酸铵180Kg，跑敌10Kg，投料后加微量元素，定容至11m³，pH5.5～6.0。

5.如权利要求1所述的中性漂白木聚糖酶的制备方法，其特征在于，步骤5)中出罐之前实消出料管线，121～122℃消毒30分钟。

6.如权利要求1所述的中性漂白木聚糖酶的制备方法，其特征在于，用所述制备方法制备出的中性漂白木聚糖酶用于纺织生物精炼漂白领域。

7.如权利要求6所述的中性漂白木聚糖酶的制备方法，其特征在于，所述用于纺织生物精炼漂白领域的配方包括中性漂白木聚糖酶，渗透剂，漆酶，焦磷酸二氢二钠及焦磷酸钠。

8.如权利要求6所述的中性漂白木聚糖酶的制备方法，其特征在于，所述中性漂白木聚糖酶的重量百分比为所述配方的50％～80％，所述渗透剂的重量百分比为所述配方的5％～10％，所述漆酶的重量百分比为所述配方的5％～15％，所述焦磷酸二氢二钠的重量百分比为所述配方的5％～10％，所述焦磷酸钠的重量百分比为所述配方的5％～15％。