[发明专利]布氏杆菌特异性多表位人工多肽的特异性抗体及其包被的免疫磁珠和应用

权利要求书

1.布氏杆菌异性表面蛋白多抗原表位串联表达后制备的人工多肽，其特征在于编码所述人工多肽的核苷酸序列为SEQ ID No.2、氨基酸序列为SEQ ID No.1。

2.一种布氏杆菌特异性抗体，其特征在于该抗体是由权利要求1所述的含布氏杆菌特异性表面蛋白多抗原表位的人工多肽免疫成年新西兰兔获得的布氏杆菌特异性抗体。

3.由权利要求2所述的布氏杆菌特异性抗体包被的免疫磁珠。

4.一种富集布氏杆菌的试剂盒，其特征在于含有权利要求3所述的布氏杆菌特异性抗体包被的免疫磁珠。

5.一种利用权利要求3所述的布氏杆菌特异性抗体包被的免疫磁珠富集检测布氏杆菌的方法，其特征在于按如下步骤进行：

(1)依据SN/T 1088-2010进行样品的预增菌：将样品加入预增菌培养液后，在5％氧气、10％二氧化碳、85％氮气的条件下，以100rpm的振荡速度，36±1℃培养7d；必要时测定增菌液的pH值并调整至7.2±0.2，42±1℃继续培养24h-48h；亦或者用等效的方法进行预增菌；

(2)取步骤(1)得到的预增菌液20-30mL，加入权利要求3所述的布氏杆菌特异性抗体包被的免疫磁珠50μL，37℃孵育1h；

(3)将其放于磁力架上，3min后弃去上清，加入30mL PBS重悬，磁力架吸下免疫磁珠后，弃去上清，如此重复洗涤3次；

(4)吸附后的免疫磁珠直接铺于选择性平板上进行分离培养，或直接提取吸附后的免疫磁珠上的DNA用PCR或荧光PCR进行检测；或者向吸附后的免疫磁珠中加入1mL 50mmol/L甘氨酸溶液，间断振荡洗脱1h，将离心管放于磁力架上，待免疫磁珠全部被吸附于管壁上时取出上清，用洗脱下的菌液直接铺于显色平板上进行分离培养，或直接提取DNA后用PCR或荧光PCR进行检测。