[发明专利]丹参素衍生物在制备防治心血管相关疾病药物中的用途

说明书

技术领域

本发明属中药制药领域，涉及中草药丹参中的特异单体丹参素的衍生物在制备药物组合物中的应用，尤其是在制备防治心血管相关疾病的药物组合物中的应用。

背景技术

心血管疾病又称为循环系统疾病，通常循环系统指人体内运送血液的器官和组织，主要包括心脏、血管(动脉、静脉、微血管)，循环系统疾病可以细分为急性和慢性，一般都是与动脉硬化有关。

现有技术公开了丹参为双子叶植物唇形科鼠尾草属植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥根及根茎。出于《神农本草经》，生于山坡草地林边道旁，或疏林干燥地上。性味苦，微寒，归心、肝经。其功效主要有活血调经，祛瘀止痛，凉血消痈，清心除烦，养血安神。丹参素(Danshensu，化学名：(R)-(+)-3-(3，4-二羟基苯基)-2-羟基丙酸)作为丹参中的有效成分之一，其抗氧化、抗凋亡的作用也有相关报道，本领域研究人员对有关丹参中的有效成分结构及其作用效果、作用机制长期以来一直在改进和探讨中。

丹参素

目前检测该点突变的方法主要是聚合酶链式反应(PCR)后进行测序，但是这一方法中的测序耗时且需要的仪器和试剂成本较高，不适合大规模推广使用。本发明经过长期艰苦的研究，并结合一些筛选的运气，研究出了一对引物并且研究出了配套的方法，可以通过PCR扩增产物的熔解分析而快速获得结果，其中无需耗时的步骤，而且熔解分析仪的维护成本比测序仪要低。由于人群的突变基因的比率很低，实践中一一检测的效率很低，因此往往用多人的混合样品进行检测，更加令人意想不到的是，本发明人研究出来的检测方法能够分辨只含1％(甚至更低)的突变型的样品，而这是测序所无法完成的，因此提高了检测效率。已有研究表明，氧化应激在心血管疾病的发生和发展中扮演了重要的角色。本发明经过长期艰苦的研究，尝试对丹参素进行结构改造，并结合L-半胱氨酸为人体内源性的氨基酸，无毒、稳定并具有明显的抗氧化作用，因此，根据互联体前药原理，研究设计合成了丹参素与L-半胱氨酸衍生物通过酰胺键结合的互联体前药(1)，可以通过丹参素与L-半胱氨酸衍生物的结合体既能将不稳定的结构因素(两个酚羟基)保护起来、提高脂溶性，又能分别释放药物活性成分，有望通过协同作用增强活性研究，探究新合成的丹参素衍生物对过氧化氢诱导的内皮细胞的保护作用，为研发新的治疗心血管疾病的药物提供新的思路。

发明内容

本发明的目的是提供中草药丹参中的丹参素衍生物在制备防治心血管相关疾病药物中的用途，尤其是丹参中的特异单体丹参素的衍生物在制备药防治心血管疾病相关病的药物组合物中的应用。

本发明所述的丹参素衍生物具有如下结构特征：

其中R¹、R²、R³为低级酰基或烃基，R⁴为低级烃基，如甲叉基、甲基、乙基、丙基、异丙基、苄基、乙酰基、丙酰基或苯甲酰基等。本发明中，代表化合物是(2R)-3-苄硫基-2-[2-乙酰氧基-3-(3，4-二乙酰氧基苯基)丙酰氨基]丙酸甲酯(1)的立体异构体及其类似物，结构如下：

本发明通过过氧化氢(H₂O₂)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化应激模型观察了该丹参素衍生物对细胞的尤其是内皮细胞的保护作用。通过MTT、LDH漏出率检测方法、JC-1染色流式细胞术等方法检测该丹参素衍生物对细胞存活率和凋亡的影响，通过Western blot方法检测该丹参素衍生物对凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、cPARP的表达以及通过MDA测定说明丹参素衍生物对细胞内MDA的影响，实验结果显示，所述的丹参素衍生物通过保护循环系统内皮细胞防治心血管相关疾病。更具体的，所述的丹参素衍生物能通过抑制心血管疾病相关基因的转录水平，抑制心血管疾病相关基因的蛋白表达水平，抑制活性氧簇的产生以及抑制相应的信号转导通路及转录因子发挥保护内皮细胞作用。

实验结果表明，所述的丹参素衍生物(1)对H₂O₂诱导的HUVEC细胞的凋亡具有明显的抑制作用，该丹参素衍生物对氧化应激损伤细胞具有显著的保护作用，该丹参素衍生物可制备防治心血管疾病相关疾病的药物。

为了便于理解，以下将通过具体的附图和具体实施方式对本发明进行详细地描述。需要特别指出的是，这些描述仅仅是示例性的描述，并不构成对本发明范围的限制。依据本说明书的论述，本发明的许多变化、改变对所属领域技术人员来说都是显而易见的。