[发明专利]二芳基吡唑苯胺类化合物的制备及其在结肠癌治疗中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及二芳基吡唑苯胺类化合物及其制备方法与抗肿瘤药物。

背景技术

癌症是一种严重威胁人类健康的疾病，临床治愈率很低。几乎所有的癌症都是由于细胞的异常增殖引起的，与调控细胞周期相关基因、蛋白的突变和失活密切相关。因此阻断异常的细胞增殖对于肿瘤的治疗是一种非常重要的手段。

Aurora激酶是有丝分裂中重要的调控激酶，与细胞的正常生长、增殖密切相关。Aurora主要有三个家族成员：Aurora-A、Aurora-B和Aurora-C，其中Aurora-A最为重要，Aurora-A蛋白的异常高表达，会导致多种肿瘤的发生，所以Aurora-A激酶已成为肿瘤治疗的重要靶点。

目前有很多小分子Aurora-A激酶抑制剂，其中吡唑环是重要的骨架结构，在最早合成并处于二期临床研究的Aurora-A激酶抑制剂药物VX-680就包含吡唑骨架，吡唑环上的氮原子可以和Aurora-A激酶ATP结合位点有氢键作用，从而抑制Aurora-A激酶活性。苯胺是一种具有抗肿瘤、抗炎和抗菌广谱药物活性的结构，苯胺中的苯环能和Aurora-A激酶ATP结合位点疏水作用和π-Cation作用，同时仲胺中的氮原子也增加化合物与Aurora-A的氢键作用。综上所述，本文中我们设计合成了一系列未经报道的二芳基吡唑苯胺类化合物，这些新化合物，可能体现出吡唑环和苯胺在Aurora-A激酶抑制和抗癌中的协同性。我们测试了这批化合物的生物活性，并发现其对人源宫颈癌HCT116细胞具有良好的抑制作用，且能抑制Aurora-A激酶活性，引起细胞凋亡。

发明内容

本发明的目的在于提供一类新型二芳基吡唑苯胺类化合物以及它们的制备方法与用途。

本发明的技术方案如下：

1.二芳基吡唑苯胺类化合物，其特征是它有如下通式：

R1为：4-氯、硝基、甲基、甲氧基。

R2为：4-溴、氯、甲氧基、氧乙基。

2.一种制备上述的二芳基吡唑苯胺类衍生物的方法，它由下列步骤组成：

步骤1.将取代基苯乙酮(20mmol)、盐酸苯肼(25mmol)、无水乙酸钠(40mmol)分别溶于乙醇，磁力搅拌，50-60℃反应4h(TLC点板检测反应)。反应完毕后将反应液旋干，乙酸乙酯和水萃取2-3次，旋干乙酸乙酯层，得到黄色固体。

步骤2.先将DMF(8ml)和POCl₃(6ml)混合冰浴15min，然后将步骤1产物溶于3ml DMF滴加至上述混合液中，恢复常温继续搅拌30min，至70-80℃反应5h，冷却至常温后，倒入冰水中，用50％NaOH调PH至7-8，抽滤并水洗3遍，烘干后得固体。

步骤3.将步骤2所得产物溶于丙酮(30ml)，然后将亚氯酸钠(30mmol)和氨基磺酸(35mmol)的混合水溶液(50ml)滴加至上述混合液中，常温下反应5h，反应完毕后将反应液旋干，用乙酸乙酯分别和饱和硫代硫酸钠、水各萃取2次，旋干乙酸乙酯层，得到白色固体。

步骤4.将步骤3得到的白色固体，取1mmol溶于氯化亚砜(1ml)，磁力搅拌，70-80℃油浴反应3h，反应完毕后将氯化亚砜旋干，溶于二氯甲烷中(2ml)。将不同取代基的苯胺(1mmol)、DMAP(1.5mmol)和K₂CO₃(4mmol)加入上述混合液，磁力搅拌，40-50℃反应6h(TLC检测反应进行程度)。反应完毕后将反应液旋干，用乙酸乙酯和水、饱和NaCl和饱和K₂CO₃各萃取2次，旋干乙酸乙酯层，用甲醇重结晶，得到纯净的化合物1-9。

本发明的二芳基吡唑苯胺类具有抑制HCT116细胞增殖的作用。因此本发明的二芳基吡唑苯胺衍生物可做潜在的抗结肠癌药物。

具体实施方式

实施例一：N-(4-氧乙基苯基)-3-(4-甲基苯)-1-苯基-1H-吡唑-4-苯胺(化合物1)的制备