[发明专利]辅助鉴定杜鹃蓟马的方法及其专用引物对

说明书

技术领域

本发明涉及昆虫检疫鉴定和害虫监测领域，具体涉及一种辅助鉴定杜鹃蓟马的方法及其专用引物对。

背景技术

蓟马是有害生物类群，约有5500种，蓟马的检疫和控制具有重要经济意义。对经济具有重大影响的蓟马约550余种，多发生在热带和亚热带地区，对水果、蔬菜生产造成直接危害，给热带地区果蔬产品的进出口贸易和调运带来严重影响，在世界植物检疫中占有重要地位。

蓟马体型细小，通常为1-1.5mm，繁殖力强、并喜爱栖息于隐秘场所，分布广泛，是农业生产和检疫上的重要害虫。对经济具有重大影响的蓟马，如西花蓟马(Frankliniella occidentalis)、黄胸蓟马(Thrips hawaiiensis)、杜鹃蓟马(Thrips andrewsi)、普通大蓟马(Megalurothrips usitatus)、烟蓟马(Thrips tabaci)、棕榈蓟马(Thrips palmi)、葱韭蓟马(Thrips alliorum、)茶黄硬蓟马(Scirtothrips dorsalis)、鳄梨蓟马(Scirtothrips perseae)等，从国外入侵以及在国内进一步扩散的风险极大，对农业生产和贸易构成了严重威胁。蓟马疫情的发展已引起国家高度重视，要求相关部门加强其检疫鉴定、疫情监测及控制工作。

从进口果蔬产品、植物花卉中所截获到的蓟马以及在国内农业生产疫情监测中所诱捕到的蓟马，均需对其进行快速、准确的种类鉴定。传统的蓟马种类鉴定技术是以成虫形态特征为依据，难于对未成熟虫态(卵和幼虫)、残损样品以及形态上非常相近的种类(如黄胸蓟马和杜鹃蓟马)进行鉴定，无法满足农业生产诊断防控及植物检疫实际工作中所面对的特殊需求(快速、准确、大规模、高通量检测鉴定蓟马种类)。

发明内容

本发明的目的是提供一种辅助鉴定杜鹃蓟马的方法及其专用引物对。

本发明提供了辅助鉴定杜鹃蓟马的特异引物对，由序列表的序列1所示DNA片段和序列表的序列2所示DNA片段组成。

所述特异引物对可用于制备试剂盒；所述试剂盒具有如下(a)和/或(b)所述的功能：(a)辅助鉴定杜鹃蓟马；(b)辅助鉴别杜鹃蓟马和黄胸蓟马。

本发明还保护包括所述特异引物对的试剂盒，；所述试剂盒具有如下(a)和/或(b)所述的功能：(a)辅助鉴定杜鹃蓟马；(b)辅助鉴别杜鹃蓟马和黄胸蓟马。所述试剂盒还可具有其它PCR扩增的常规组分，如Taq酶、10×PCR Buffer(含Mg²⁺)、dNTPs等。

本发明还提供了一种辅助鉴定杜鹃蓟马的方法，包括如下步骤：以待测蓟马的基因组DNA为模板，用所述特异引物对进行PCR扩增；如果得到250-500bp的PCR扩增产物，所述待测蓟马为候选的杜鹃蓟马；如果没有得到250-500bp的PCR扩增产物，所述待测蓟马为候选的非杜鹃蓟马。所述PCR扩增产物具体可为285bp-295bp，如289bp。所述待测蓟马为杜鹃蓟马、黄胸蓟马、Thrips parvispinus或普通大蓟马。

本发明还保护一种辅助鉴别杜鹃蓟马和黄胸蓟马的方法，包括如下步骤：以待测蓟马的基因组DNA为模板，用所述特异引物对进行PCR扩增；如果得到250-500bp的PCR扩增产物，所述待测蓟马为候选的杜鹃蓟马；如果没有得到250-500bp的PCR扩增产物，所述待测蓟马为候选的黄胸蓟马。所述PCR扩增产物具体可为285bp-295bp，如289bp。所述待测蓟马为杜鹃蓟马或黄胸蓟马。

所述特异引物对可用于辅助鉴定杜鹃蓟马。

所述特异引物对可用于在辅助鉴别杜鹃蓟马和黄胸蓟马。

所述特异引物对可用于辅助鉴定待测植物是否被杜鹃蓟马侵染。

本发明具体解决的问题如下：(1)解决杜鹃蓟马的快速鉴定问题，实现形态相似的两种蓟马(黄胸蓟马和杜鹃蓟马)的区分，实现果蔬和园艺植物上常见的蓟马中杜鹃蓟马的鉴定；(2)解决了杜鹃蓟马非成虫态样品的种类鉴定问题；(3)开发杜鹃蓟马特异鉴定试剂盒，实现杜鹃蓟马的高效、便捷、准确鉴定。