[发明专利]猫棒束孢粗多糖及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及真菌提取物，具体属于一种猫棒束孢粗多糖(IFP)及其制备方法，以及IFP在制备治疗慢性肾功能衰竭药物中的应用。

背景技术

猫棒束孢(Isaria felina)是从天然冬虫夏草子实体中经菌种分离培养获得的一种菌株，在分类上属于半知菌纲、丛梗孢目、棒束孢属。经中国科学院微生物研究所鉴定为Isaria felina(DC.：Fr)Fr，该菌种已被中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏(保藏号：CGMCC NO.0706)，并取得国家发明专利(ZL02103669.1)。

Deffieux Gerard等人(J Antibiot(Tokyo).1981，34(10)：1261-1265.)从Isaria felina中提取分离得到环羧酚酸肽结构的杀虫剂Isariins B，C和D，并对Isariins B，C和D的结构进行了鉴定(J Antibiot(Tokyo).1981，34(10)：1266-1270.)。郭永霞从猫棒束孢菌丝体中分离纯化得到具有抗真菌作用的环缩肽isarfelin，并对isarfelin进行了理化性质的分析、结构鉴定，并发现isarfelin具有抑制细菌、抵抗真菌的活性(郭永霞.猫棒束孢菌抗真菌多肽和巨大口蘑抗真菌蛋白的分离纯化及特性的研究：[博士论文].北京：中国农业大学，2005)。Ikumoto等研究发现冬虫夏草、蛹虫草及猫棒束孢的浸出液对离体心房有负收缩效应，同时对电刺激回肠的收缩反应及人血小板的凝结有抑制作用(Journal of the Pharmaceutical Society of Japan，1991，111(9)：504-509)。

我们在对猫棒束孢的研究中发现猫棒束孢菌丝粉对顺铂引起的急性肾功能损伤有很好的保护作用，并申报了专利，专利申请号为201110175421.4。经过对猫棒束孢粗多糖的提取及其治疗慢性肾功能衰竭的研究，发现猫棒束孢中的粗多糖成分同样具有肾脏保护作用，对慢性肾功能衰竭有较好的治疗效果。目前尚未见到关于猫棒束孢粗多糖在治疗慢性肾功能衰竭方面的研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种猫棒束孢粗多糖，以及该多糖在制备治疗慢性肾功能衰竭药物中的应用。

本发明所涉及的猫棒束孢是从天然冬虫夏草子实体中经分离培养获得，该菌株保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏号为CGMCC NO.0706。

本发明使用的猫棒束孢菌丝体可由专利号ZL02103669.1的方法培养得到。

本发明提供的一种猫棒束孢粗多糖(IFP)，通过如下方法制得：取菌丝粉，加入3-5倍菌丝粉重量的蒸馏水，沸水浴提取70-110min，3000r/min转速下离心4-6min；于沉淀中继续加人3-5倍菌丝粉重量的蒸馏水，沸水浴提取20-40min，3000r/min转速下离心4-6min；于沉淀中继续加人3-5倍菌丝粉重量的蒸馏水，沸水浴提取20-40min，3000r/min离心4-6min；合并三次提取的上清液，水浴浓缩至800-1000mL；加人3-4倍的95％乙醇，充分混匀，沉淀过夜；取沉淀，于70℃烘干备用。

所述95％乙醇的加人量优选为浓缩后上清液体积的3.75倍。

本发明猫棒束孢粗多糖在制备治疗慢性肾功能衰竭药物中的应用：将猫棒束孢粗多糖用于动物实验。实验结果显示：大鼠连续灌胃腺嘌呤30d后(100mg·kg^-1·d^-1)，其血清中CRE和BUN水平显著升高，成模大鼠在灌胃猫棒束孢粗多糖后其血清中CRE和BUN水平均显著下降；IFP可以部分纠正慢性肾功能衰竭病情进展中常见的贫血问题；IFP模型组大鼠肾脏病变严重，而给药组大鼠肾脏病理改变较轻。

实验研究结果表明，猫棒束孢粗多糖对腺嘌呤引起的大鼠慢性肾功能衰竭有很好的治疗作用，在不超过50mg/kg的给药剂量下对慢性肾功能衰竭有较好的治疗效果，是一种具有良好开发前景的抗肾功能衰竭的药物。

附图说明

图1：正常组肾脏病理图(HE染色，×100)。

图2：模型组肾脏病理图(HE染色，×100)

图3：IFP给药低剂量组肾脏病理图(HE染色，×100)

具体实施方式

1.实验材料及方法

1.1实验动物