[发明专利]利用大肠杆菌产γ-谷氨酰转肽酶高效合成L-茶氨酸的方法无效
申请号: | 201210007175.6 | 申请日: | 2012-01-11 |
公开(公告)号: | CN102533887A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 王汉领;徐大春;沈青红;吕志祥;万红贵;殷志敏 | 申请(专利权)人: | 江苏阿格罗生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P13/04 | 分类号: | C12P13/04;C12R1/19 |
代理公司: | 南京天翼专利代理有限责任公司 32112 | 代理人: | 蒋家华 |
地址: | 213341 江苏省常州*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 大肠杆菌 谷氨酰转 肽酶 高效 合成 氨酸 方法 | ||
1.利用大肠杆菌产γ-谷氨酰转肽酶高效合成L-茶氨酸的方法,其特征在于包括如下步骤:
a) 将大肠杆菌(Escherichia coli)南师一号CCTCCNo.M209166的原始发酵液利用孔径为0.001-0.01um的超滤膜进行过滤,得到酶和菌体的截留液;
b) 往酶和菌体的截留液中加入乙胺溶液调节pH至10-11,放置2-3小时使菌体解体释放出细胞内的γ-谷氨酰转肽酶,得到酶浓缩液;
c)取步骤b)中得到的酶浓缩液加入到含有 L-谷氨酰胺的水溶液中形成酶反应体系,然后通过往酶反应体系中加入乙胺溶液控制酶反应体系的pH为9-10.5,酶转化温度为30-35℃。
2.根据权利要求1所述的利用大肠杆菌产γ-谷氨酰转肽酶高效合成L-茶氨酸的方法,其特征在于所述步骤a)中超滤膜的操作压力为0.15-0.45MPa,温度为30-35℃。
3.根据权利要求1所述的利用大肠杆菌产γ-谷氨酰转肽酶高效合成L-茶氨酸的方法,其特征在于所述步骤b)和步骤c)中所使用的乙胺溶液的质量浓度为50-70%。
4.根据权利要求1所述的利用大肠杆菌产γ-谷氨酰转肽酶高效合成L-茶氨酸的方法,其特征在于步骤c)中的酶反应体系中L-谷氨酰胺的浓度为40-50g/L。
5.根据权利要求1所述的利用大肠杆菌产γ-谷氨酰转肽酶高效合成L-茶氨酸的方法,其特征在于步骤c)中的酶反应体系中酶活力为4000-6000 U/L。
6.根据权利要求1所述的利用大肠杆菌产γ-谷氨酰转肽酶高效合成L-茶氨酸的方法,其特征在于步骤c)中的酶转化时间为12-14小时。
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