[发明专利]类鲨鱼硫酸软骨素及其制备方法

权利要求书

1.不含三-、四-和2,4二-硫酸酯化的二糖类的类鲨鱼硫酸软骨素，其由60-99%的6-硫酸酯、0.5-30%的2,6-二硫酸酯、0.1-5%的4,6-二硫酸酯、0.1-5%的未硫酸酯化的软骨素和0.1-1%的4-硫酸酯组成，所有的百分比表达为相对于所述类鲨鱼硫酸软骨素的总二糖含量，所述类鲨鱼硫酸软骨素显示40-85kDa的数均分子量(Mn)和50-95kDa的重均分子量(Mw)。

2.根据权利要求1的类鲨鱼硫酸软骨素，其由70-90%的6-硫酸酯、8.5-20%的2,6-二硫酸酯、0.1-5%的4,6-二硫酸酯、0.1-5%的未硫酸酯化的软骨素和0.1-1%的4-硫酸酯组成，所有的百分比表达为相对于所述类鲨鱼硫酸软骨素的总二糖含量，所述类鲨鱼硫酸软骨素显示40-65kDa的数均分子量(Mn)和50-70kDa的重均分子量(Mw)。

3.根据权利要求1或2的类鲨鱼硫酸软骨素，其中2,6-二硫酸酯和4,6-二硫酸酯的总量达总二糖含量的10-25%。

4.根据权利要求1至3中任意一项的类鲨鱼硫酸软骨素，其用于预防或治疗骨关节炎或用于维持肌肉骨骼的健康。

5.组合物，其包含根据权利要求1至3中任意一项的类鲨鱼硫酸软骨素和药学或营养学上可接受的载体。

6.根据前述权利要求的组合物，其用于预防或治疗骨关节炎或用于维持肌肉骨骼的健康。

7.制备根据前述权利要求中任意一项的类鲨鱼软骨素的方法，其包括:

a)使用选自四甲基-、四乙基-和四丁基-铵或吡啶鎓的盐，使以游离酸形式预先溶于含水环境中的未硫酸酯化的软骨素成盐；

b)将来自步骤a)的游离酸和/或钠盐形式的成盐的未硫酸酯化的软骨素干燥至5-15%的含水量；

c)将来自步骤b)的成盐的未硫酸酯化的软骨素在100℃-170℃的温度干燥至0.1-3%的含水量；

d)通过以1-3小时的时间间隔加入1-2当量的三氧化硫吡啶络合物或三氧化硫二甲基甲酰胺络合物在0℃-30℃的温度将溶于N-甲基吡咯烷酮或二甲基甲酰胺中的来自步骤c)的成盐的未硫酸酯化的软骨素的6-位选择性硫酸酯化，直至加入总共2-15当量的三氧化硫吡啶络合物或三氧化硫二甲基甲酰胺络合物；将得到的溶液在搅拌下放置2-24h；

e)用碳酸氢钠或碳酸钠水溶液淬灭步骤d)中进行的反应，将得到的溶液过滤，并浓缩至干燥，得到干燥的固体；

f)将干燥的固体溶于氯化钠水溶液中，将得到的溶液超滤并渗析；

g)回收来自步骤f)的溶液的产物；

h)纯化来自步骤g)的产物，得到酸形式或为其钠盐的来自步骤g)的产物；

i)回收来自步骤h)的产物。

8.根据前述权利要求的方法，其中步骤a)中的未硫酸酯化的软骨素的成盐使用选自四甲基-、四乙基-和四丁基-铵的盐进行。

9.根据权利要求7或8的方法，其中步骤a)中的未硫酸酯化的软骨素的成盐使用四丁基铵进行。

10.权利要求7至9中任意一项的方法，其中步骤b)中的未硫酸酯化的软骨素的干燥通过冷冻干燥或喷雾干燥进行。

11.根据权利要求7至10中任意一项的方法，其中在步骤c)中的未硫酸酯化的软骨素盐的干燥进行至0.5-2%的水。

12.根据权利要求7至11中任意一项的方法，其中来自步骤c)的未硫酸酯化的软骨素盐的溶解在二甲基甲酰胺中进行。

13.根据权利要求7至12中任意一项的方法，其中添加总共6-12当量的三氧化硫吡啶络合物进行步骤d)中的选择性硫酸酯化。

14.根据权利要求7至13中任意一项的方法，其中添加总共6-9当量的三氧化硫吡啶络合物进行步骤d)中的选择性硫酸酯化。

15.根据权利要求7至12中任意一项的方法，其中添加总共1-9当量的三氧化硫二甲基甲酰胺络合物进行步骤d)中的选择性硫酸酯化。

16.根据前述权利要求的方法，其中添加总共2-4当量的三氧化硫二甲基甲酰胺络合物进行步骤d)中的选择性硫酸酯化。