[发明专利]用于扩增和稳定天然调节性T细胞的方法和组合物

权利要求书

1.一种扩增天然调节性T细胞(nTreg)的方法，所述方法包括用调节性的组合物处理包含纯度大于99%的CD4⁺CD25⁺nTreg的细胞培养物，其中所述调节性的组合物包含0.01至20 μM的全反式维甲酸(atRA)或其它维生素A衍生物。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述维生素A衍生物为全反式维甲酸(atRA)。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述调节性的组合物包含0.1至2.0 μM的全反式维甲酸(atRA)。

4.如权利要求1所述的方法，其中所述维生素A衍生物为合成类视黄醇。

5.如权利要求4所述的方法，其中所述合成类视黄醇为Am80。

6.如权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述调节性的组合物进一步包含细胞因子。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述细胞因子为TGF-β。

8.如权利要求1所述的方法，其中所述调节性的组合物进一步包含IL-2。

9.如权利要求1所述的方法，其中所述调节性的组合物进一步包含T细胞激活因子。

10.如权利要求9所述的方法，其中所述T细胞激活因子为选自抗CD3、抗CD28或抗CD3和抗CD28的组合的成员。

11.如权利要求1所述的方法，其中所述调节性的组合物进一步包含防止编码转录因子的基因甲基化的试剂。

12.如权利要求11所述的方法，其中所述试剂为甲基转移酶抑制剂，所述转录因子是FOXP3。

13.如权利要求12所述的方法，其中所述甲基转移酶抑制剂为氮杂胞苷。

14.如权利要求1所述的方法，其中所述调节性的组合物进一步包含是组蛋白脱乙酰酶抑制剂的试剂。

15.如权利要求14所述的方法，其中所述组蛋白脱乙酰酶抑制剂为选自曲古抑菌素A、ppARγ激动剂和丙戊酸的成员。

16.一种稳定nTreg的表现型的方法，所述方法包括用调节性的组合物体外处理纯度大于99%的CD4⁺CD25⁺nTreg，其中所述调节性的组合物包含0.01至20 μM的atRA。

17.如权利要求16所述的方法，其中所述调节性的组合物包含0.1至2.0 μM的atRA。

18.如权利要求16所述的方法，其中所述稳定包括使所述nTreg抵抗Th17转化。

19.如权利要求16所述的方法，其中所述稳定包括在炎症环境中保持nTreg表现型。

20.如权利要求19所述的方法，其中所述nTreg表现型包括选自表达FOXP3、抑制活性及其组合的方法。

21.如权利要求1所述的方法，其中所述细胞培养物经受流式细胞术以在所述用所述调节性的组合物处理之前和/或之后富集FOXP3+细胞。

22.一种降低与nTreg中的炎症响应相关的转录因子表达的方法，所述方法包括用包含0.01至20 μM的atRA的调节性的组合物体外处理纯度大于99%的CD4⁺CD25⁺nTreg。

23.处理的nTreg在制备用于治疗患者的异常免疫反应或自身免疫疾病的药物中的用途，其中所述处理的nTreg通过用包含0.01至20 μM的atRA的调节性的组合物处理包含纯度大于99%的CD4⁺CD25⁺nTreg的细胞培养物来产生。

24.如权利要求22所述的方法，其中所述调节性的组合物包含0.1至2.0 μM的atRA。

25.如权利要求22所述的方法，其中所述调节性的组合物进一步包含TGF-β。

26.如权利要求22或25所述的方法，其中所述调节性的组合物进一步包含IL-2。