[发明专利]具有二萜合酶活性的多肽

权利要求书

1.分离的多肽，

该多肽包含氨基酸序列，所述氨基酸序列包含

与SEQ ID NO：1具有至少50％序列同一性的序列，

与SEQ ID NO：2具有至少40％序列同一性的序列，和

至少1个选自以下的序列

i)与SEQ ID NO：7具有至少15％序列同一性的序列；

ii)与SEQ ID NO：4具有至少25％序列同一性的序列；

iii)与SEQ ID NO：5具有至少45％序列同一性的序列；和

iv)与SEQ ID NO：6具有至少45％序列同一性的序列，

其中SEQ ID NO：1-2和4-7源自Clitopiluspasseckerianus，并且其中所述多肽是二萜合酶。

2.根据权利要求1的分离的多肽，其中所述氨基酸序列还包含与SEQID NO：3具有至少50％序列同一性的序列，其中SEQ ID NO：3源自Clitopilus passeckerian us。

3.根据权利要求1和2中任一项的分离的多肽，其中多肽的分子量在90kDa和140kDa之间，特别地在100kDa和130kDa之间，特别地在105kDa和120kDa之间；

和/或

其中多肽包含这样的氨基酸序列，所述氨基酸序列包含与SEQ IDNO：9具有至少70％的序列同一性，更优选地与SEQ ID NO：9具有至少80％，甚至更优选地至少85％，或甚至至少90％，例如甚至更优选地至少95％的序列同一性的序列。

4.根据权利要求1至3中任一项的分离的多肽，其中所述多肽能催化牻牛儿基牻牛儿焦磷酸转化为截短侧耳素前体，特别地转化为根据式(I)的化合物。

5.分离的核酸分子，其包含

A)编码根据权利要求1至4中任一项的多肽或SEQ ID NO：9的多肽的核苷酸序列，

B)核苷酸序列，所述核苷酸序列是

a)SEQ ID NO：8的序列；或

a’)SEQ ID NO：15的序列或与其互补的序列；或

b)a’)中限定的序列的部分序列，所述部分序列编码二萜合酶；或

c)编码二萜合酶并与a’)中限定的序列具有至少40％的序列同一性，或与a)中限定的序列或b)中限定的部分序列具有至少60％的序列同一性的序列；或

d)编码二萜合酶并由于a)、a’)、b)和c)中任一项限定的序列的遗传编码导致退化的序列；或

e)编码二萜合酶并能与SEQ ID NO：8和/或SEQ ID NO：13在严格条件下杂交的序列，

C)如项B中限定的核苷酸序列的至少18个连续核苷酸，

和/或

D)至少18个连续核苷酸并且能与具有如项A或项B中限定的核苷酸序列的核酸分子在严格条件下杂交。

6.根据权利要求1至4中任一项的分离的多肽或根据权利要求5的分离的核酸分子，其中所述多肽或核酸分子能够源自真菌宿主，特别是来自担子菌门(basidomycota)，更特别地来自伞菌目(agaricales)，甚至更特别地来自粉褶菌科(entolomataceae)_的真菌，

特别地其中所述多肽或核酸分子能够源自Clitopilus pinsitus或Clitopilus passeckerian us。

7.包含如权利要求5A或5B中限定的核酸序列的载体。

8.选自细胞、组织和非人生物的非天然存在的宿主，所述宿主包含至少一个含有如权利要求5A或5B中限定的核苷酸序列的核酸分子和/或根据权利要求7的载体，

特别地，其中所述宿主是真菌宿主，更特别地是来自担子菌门，更特别地来自伞菌目，更特别地来自粉褶菌科的真菌。

9.生产根据权利要求1至4中任一项的多肽的方法，所述方法包括

(i)将至少一个根据权利要求5A或5B的核酸分子和/或至少一个根据权利要求7的载体引入选自细胞、组织和非人生物的宿主，和

(ii)在适于生产多肽的条件下培养宿主，

特别地其中该方法还包括步骤(iii)从宿主回收多肽。