[发明专利]一种安全性慢病毒载体及其应用有效
申请号: | 201110385219.4 | 申请日: | 2011-11-25 |
公开(公告)号: | CN102443604A | 公开(公告)日: | 2012-05-09 |
发明(设计)人: | 曾溢滔;方彧聃;张敬之 | 申请(专利权)人: | 上海市儿童医院 |
主分类号: | C12N15/867 | 分类号: | C12N15/867 |
代理公司: | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人: | 朱水平;沈利 |
地址: | 200040 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 安全性 病毒 载体 及其 应用 | ||
1.一种安全性慢病毒载体,其特征在于,该慢病毒载体携带了整合酶Cre基因表达盒,并且在3’LTR的U3区含有LoxP位点序列,在U3区中并在LoxP位点的下游含有用于导入外源基因的限制性酶切位点。
2.如权利要求1所述的安全性慢病毒载体,其特征在于,在3’LTR的U3区还含有cHS4的400bp核心序列和SV40的2×USE两种元件中的任何一种或两种。
3.如权利要求7所述的安全性慢病毒载体,其特征在于,在3’LTR的U3区含有5’方向至3’方向依次为反向接入的cHS4元件和正向接入的2×USE元件。
4.如权利要求7所述的安全性慢病毒载体,其特征在于,所述的cHS4的400bp核心序列和/或SV40的2×USE在U3区的位置是在U3区中LoxP位点序列的下游。
5.如权利要求1所述的安全性慢病毒载体,其特征在于,所述的慢病毒载体是慢病毒载体FUGW。
6.如权利要求4所述的安全性慢病毒载体,其特征在于,所述的整合酶Cre基因在慢病毒载体FUGW中的位置是原GFP荧光蛋白基因的位置。
7.一种如权利要求1所述的安全性慢病毒载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤,
1)构建携带了整合酶Cre基因表达盒,并且在3’LTR的U3区插入了LoxP位点序列得慢病毒载体;
2)在U3区中LoxP位点的下游位置插入cHS4的400bp核心序列和/或SV40的2×USE;
3)在U3区中LoxP位点的下游位置引入用于插入外源基因的酶切位点。
8.一种携带外源基因的重组慢病毒载体,其特征在于,该慢病毒载体携带了整合酶Cre基因表达盒,并且在3’LTR的U3区含有LoxP位点序列,在U3区中并在LoxP位点的下游含有外源基因。
9.如权利要求8所述的重组慢病毒载体,其特征在于,所述的外源基因是AHSP基因。
10.如权利要求1安全性慢病毒载体或8所述的重组慢病毒载体在基因克隆或表达中的应用。
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