[发明专利]反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达中的反转录反应体系无效

专利信息
申请号: 201110362856.X 申请日: 2011-11-14
公开(公告)号: CN102864211A 公开(公告)日: 2013-01-09
发明(设计)人: 金星亮;白丽君;常菁 申请(专利权)人: 江苏迈健生物科技发展有限公司
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 214000 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 转录 pcr 分析 ivf 单个 植入 胚胎 基因 表达 中的 反应 体系
【权利要求书】:

1.一种反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达方法中的反转录反应体系,所述分析基因表达方法包括步骤:

标本收集及纯化;

反转录反应;

反转录阴性对照和阳性对照;

反转录产物进行实时定量PCR检测;

使用组织细胞RNA进行优化PCR条件;

在该条件下同时放大扩增阴性对照和阳性对照;

采用相对定量的方法检测目的基因的表达量;以及

进行统计学分析;

其中,所述反转录反应的反应体系为:

模板1.3μl,反转录酶2.5U,随机引物2.5μM,dNTPs0.5μM,Mg++4mM,RNase抑制剂0.2U,10xPCR缓冲液0.4μl,加Milli Q超纯水至终体积4μl。

2.如权利要求1所述的反转录PCR分析IVF单个植入前胚胎的基因表达方法中反转录反应体系,其中所述反转录反应的反应条件为:

25℃下10分钟;然后42℃下2分钟;然后99℃下2分钟以及4℃下10分钟。

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