[发明专利]一种快速测定蒸馏酒中氨基甲酸乙酯含量的方法

说明书

技术领域

一种快速测定蒸馏酒中氨基甲酸乙酯含量的方法，涉及应用顶空固相微萃取与气相色谱-质谱联用技术检测蒸馏酒中氨基甲酸乙酯的方法。本发明属于分析检测技术领域。

背景技术

存在于蒸馏酒中的氨基甲酸乙酯（EC）含量甚微，大多在几十μg/L到几百μg/L。传统测定方法中，预处理方法采用液液萃取（LLE）和固相萃取（SPE）的操作，比较烦琐，费时费力，且过程中需要用到有一定危害的有机溶剂，不利于分析人员的身体健康，同时也不经济环保。

发明内容

本发明的目的是提供一种简单快速测定酒精度较高的蒸馏酒中EC的方法。

本发明的技术方案：量取酒样，旋转蒸发除杂，水洗定容后置于顶空瓶中，加入PC内标溶液，再加入氯化钠，旋紧瓶盖，插入萃取头搅拌，萃取富集EC，再用气相色谱-质谱联用技术进行定性定量分析。

旋蒸除杂：取20 mL蒸馏酒样品，40℃旋转蒸发到10 mL，超纯水洗旋蒸瓶三次，用超纯水定容到原体积20 mL。

顶空固相微萃取：吸取上述处理后酒样8 mL置于20 mL的顶空瓶中，加入5 μL用乙醇配制的150 mg/L的PC内标溶液，再加入3 g氯化钠，旋紧瓶盖，插入萃取头，在50-70℃下250 rpm恒温搅拌萃取30-45 min。

气相色谱-质谱联用检测：萃取完毕后将萃取头取出，插入气相色谱进样口250 ℃热解吸5 min，毛细管柱DB-Wax（15-60 m×0.25-0.32 mm i.d.×0.25 μm）或HP-5（15-60m×0.25-0.32 mm i.d.×0.25 μm），载气为He，流速2 mL / min；不分流进样。程序升温：50℃恒温2 min，以5℃/min的速度升温至170℃，再以10℃/min的速度升温至230℃，保持5 min。MS条件为EI电离源，电子能量70 eV，离子源温度230°C，扫描范围35.00~350.00 amu，SIM模式特征离子62。通过比对样品和标准品的保留时间来确认EC峰。

标准曲线的建立：制作标准曲线所用的一系列EC浓度的溶液，均是用储藏液（采用EC标准品和色谱纯无水乙醇配制而成的高浓度EC溶液）逐步稀释所得。将上述稀释后的EC溶液加入到模拟酒样（用超纯水与色谱纯无水乙醇配制的50%vol乙醇水溶液）中，对添加EC标准液的模拟酒样进行旋转蒸发，顶空固相微萃取，最后进行GC-MS检测，以EC与PC峰面积之比为横坐标，EC与PC的浓度比为纵坐标，绘制标准曲线，各项参数见表1。

酒样测定：用旋转蒸发仪减压蒸掉酒样中的酒精及低沸点化合物，然后用顶空固相微萃取技术富集蒸馏酒中的EC，再用气相色谱-质谱联用进行定性定量分析，图1为示例色谱图。根据样品中EC与PC的面积比，对照标准曲线算得样品中的EC含量。

有益效果：

本发明采用顶空固相微萃取与气相色谱-质谱联用技术，建立了快速简便检测蒸馏酒中EC的方法，简单预处理后，萃取与进样自动快速高效，且无需有机溶剂，低碳环保，克服了以往方法中的不足。建立的方法能够快速检测并准确定量蒸馏酒中的EC。以PC为内标，检测限1.16 μg/L，线性相关性系数大于0.99，回收率为89%~119%，相对标准偏差1.26%-12.51％。该方法可用于酒精含量较高的蒸馏酒中EC的定量检测。

主要试剂与材料：

氨基甲酸乙酯（EC）、氨基甲酸丙酯（PC）；氯化钠；超纯水（Milli-Q 系统, Millipore，Badford，MA，USA）；蒸馏酒样品。

主要仪器：

旋转蒸发仪、固相微萃取头（PA、DVB/PDMS、DVB/CAR/PDMS）；气相色谱质谱联用仪：GC 6890N-MSD 5975；DB-Wax（15-60 m×0.25-0.32 mm i.d.×0.25 μm）或HP-5（15-60m×0.25-0.32 mm i.d.×0.25 μm）。

回收率测定：通过对6种不同香型的白酒中添加EC标准品进行回收率测定，重现性实验中每个酒样平行3次。结果见表2。

酒样测定：选取五种不同香型白酒以及三种白兰地为目标酒样，旋蒸除杂后进行固相微萃取以及气相色谱-质谱联用定量分析。表3中列出了几种蒸馏酒中EC的含量。

有益效果：