[发明专利]一种广谱抗病毒的药物及其制备方法和应用无效

专利信息
申请号: 201110324897.X 申请日: 2011-10-24
公开(公告)号: CN102349995A 公开(公告)日: 2012-02-15
发明(设计)人: 项荣;石迎迎 申请(专利权)人: 武汉大学
主分类号: A61K38/48 分类号: A61K38/48;C07K19/00;C12N9/12;C12N9/22;C12N15/70;A61P31/14;A61P31/16;A61P31/18;A61P31/20;A61P31/22;A61K38/16;A61K38/46;C12R1/19
代理公司: 武汉宇晨专利事务所 42001 代理人: 黄瑞棠
地址: 430072*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 一种 广谱 抗病毒 药物 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种广谱抗病毒的药物,其特征在于:

广谱抗病毒的药物由蛋白转导标签、双链RNA检测结构域和细胞凋亡诱导结构域组成:

①蛋白转导标签为下列A、B或C

A:转录反式激活蛋白,氨基酸序列如SEQ NO.1所示;

B:蛋白转导结构域4,氨基酸序列如SEQ NO.2所示; 

C:多聚精氨酸,氨基酸序列如SEQ NO.3所示;   

②双链RNA检测结构域为下列A、B或C

A:干扰素诱导的RNA依赖的蛋白激酶,氨基酸序列如SEQ NO.4所示;

B:2-5A依赖的核糖核酸酶,氨基酸序列如SEQ NO.5所示;

C:牛痘病毒E3L蛋白,氨基酸序列如SEQ NO.6所示;

③细胞凋亡诱导结构域为下列A、B或C

A:生长抑制基因3蛋白,氨基酸序列如SEQ NO.7所示;

B:凋亡蛋白酶活化因子-1,氨基酸序列如SEQ NO.8所示;

C:鼠凋亡蛋白酶活化因子-1,氨基酸序列如SEQ NO.9所示。

2.按权利要求1所述的一种广谱抗病毒的药物的制备方法,其特征在于:

本广谱抗病毒药物的制备方法包括基因重组蛋白的构建、表达和纯化:

a、收集培养的细胞,利用Trizol法提取细胞总RNA;

b、对提取的细胞总RNA,利用针对上述基因重组蛋白各区域设计的特异性引物,进行一步PCR扩增,即先利用随机引物进行反转录,将RNA反转录成cDNA,再利用特异性引物扩增得到相应的基因重组蛋白各区域序列;

c、切胶回收目的片段,连接T载体测序验证所扩增序列正确性;

d、分别对目的片段和pET32a进行双酶切和连接,构建基因重组蛋白克隆; 

e、将构建好的克隆转化大肠杆菌,IPTG诱导目的蛋白的表达;

f、根据表达蛋白质His-Tag,将重组蛋白过滤His融合蛋白纯化柱,得到纯化的基因重组蛋白质。

3.按权利要求1所述的一种广谱抗病毒的药物的应用,其特征在于:

①细胞模型实验;

②动物模型实验;

③对在感染细胞期间产生dsRNA的DNA或RNA病毒起抗病毒作用。

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