[发明专利]一种有机物降解复合菌剂的制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于生物增强水处理系统的特异性有机物降解复合菌剂制备及应用方法，特别是涉及由施氏假单胞菌、恶臭假单胞菌、穿孔假单胞菌、枯草芽孢杆菌所组成的复合菌剂制备及应用方法。

背景技术

随着工农业生产的快速发展，水源水质日趋严重，污染物种类趋于复杂化和多样化，水体中存在的持久性有机污染物，可生物降解性有机物，致突变物质，使得常规水处理工艺已显得力不从心，为有效去除水中有毒有害的有机污染物，生物处理技术得到了广泛应用，该技术将常规处理工艺与微生物降解合为一体，对有机污染物具有一定的去除作用，但是，该技术仍存在一些不足，主要表现为：在常规工艺中自然形成的生物膜，其生物菌群活性和数量较低，且滤料表面生物相构成复杂，难以形成高活性菌群，针对一些有毒有害有机物的降解效能也得不到进一步提高。基于以上问题，通过菌种筛选组合，培养驯化得到具有高活性、稳定性、特别对卤代烃类、苯酚类、苯酸类、芳香烃类、多环芳烃类、杂环化合物、邻苯二甲酸酯等有毒有害有机物具有降解能力的复合菌剂，并将其固定在载体上，从而增强水处理工艺对有机物的降解效能，提高生物处理工艺稳定性，是本领域中的重要课题。

发明内容

    本发明的目的是通过从现有的各类菌种中经过筛选组合培养从而提供一种有机物降解复合菌剂的制备方法及应用。具有生物活性高、有机污染物降解能力强、可长期稳定运行且价格低廉的的特点。本发明的另一主要目的是提供一种微污染水源水的处理方法，具体处理方法就是应用生物活性炭+复合菌剂增强。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案是：

一种用于生物增强水处理系统的特异性有机物降解复合菌剂及制备方法，其特征在于：将施氏假单胞菌（Pseudomonas-stutzeri），恶臭假单胞菌（Pseudomonas-putida），穿孔假单胞菌（Pseudomonas-pertucinogena），枯草芽孢杆菌（Bacillus-subtilis）四种菌经过组合筛选混合培养制成，其中施氏假单胞菌含量20-30%；恶臭假单胞含量20-30%；穿孔假单胞菌含量10-20%；枯草芽孢杆菌含量30-50%。

上述四种菌含量的优选值为：施氏假单胞菌含量25%；恶臭假单胞含量25%；穿孔假单胞菌含量10%；枯草芽孢杆菌含量40%。

制备上述所述复合菌剂的方法，其步骤如下：

（1）培养液配置：

Ⅰ：牛肉膏3g，蛋白胨10g，葡萄糖10g，(NH₄)₂SO₄ 5g/L, K₂HPO₄ 2g/L, NaH₂PO₃ 2g/L, NaCl 5g，清水1000mL，112℃灭菌20min

Ⅱ：蛋白胨10g，葡萄糖10g，(NH₄)₂SO₄ 5g/L, K₂HPO₄ 2g/L, NaH₂PO₃ 2g/L, NaCl 5g，清水1000mL，112℃灭菌20min

Ⅲ：葡萄糖10g，(NH₄)₂SO₄ 5g/L, K₂HPO₄ 2g/L, NaH₂PO₃ 2g/L, NaCl 5g，清水1000mL，112℃灭菌20min

Ⅳ： (NH₄)₂SO₄ 5g/L, K₂HPO₄ 2g/L, NaH₂PO₃ 2g/L, NaCl 5g，清水1000mL，112℃灭菌20min

（2）将4种菌分别接斜面，培养24-36小时，然后各加入到无菌水中，振荡30分钟，待均匀后用血球计数板计数，使每只试管中各种菌的菌数均为10⁸个/mL；

（3）一级培养：将4种菌的菌液分别放入Ⅰ号培养基中进行培养，在180转/分钟摇床于18℃培养32小时，pH值为5-6，使菌数达10⁸个/mL,之后按照如上所述单位体积内菌数比例将4种菌剂混合；