[发明专利]一种有机物降解复合菌剂的制备方法及应用

权利要求书

1.一种有机物降解复合菌剂，其特征在于：将施氏假单胞菌，恶臭假单胞菌，穿孔假单胞菌，枯草芽孢杆菌四种菌经过组合筛选混合培养制成，其中施氏假单胞菌含量20-30%；恶臭假单胞含量20-30%；穿孔假单胞菌含量10-20%；枯草芽孢杆菌含量30-50%。

2.按照权利要求1所述的有机物降解复合菌剂，其特征在于：所述的四种菌含量的优选值为：施氏假单胞菌含量25%；恶臭假单胞含量25%；穿孔假单胞菌含量10%；枯草芽孢杆菌含量40%。

3.一种如权利要求1所述的有机物降解复合菌剂的制备方法，其特征在于：步骤如下：

（1）培养液配置：

Ⅰ：牛肉膏3g，蛋白胨10g，葡萄糖10g，(NH₄)₂SO₄ 5g/L, K₂HPO₄ 2g/L, NaH₂PO₃ 2g/L, NaCl 5g，清水1000mL，112℃灭菌20min；

Ⅱ：蛋白胨10g，葡萄糖10g，(NH₄)₂SO₄ 5g/L, K₂HPO₄ 2g/L, NaH₂PO₃ 2g/L, NaCl 5g，清水1000mL，112℃灭菌20min；

Ⅲ：葡萄糖10g，(NH₄)₂SO₄ 5g/L, K₂HPO₄ 2g/L, NaH₂PO₃ 2g/L, NaCl 5g，清水1000mL，112℃灭菌20min；

Ⅳ： (NH₄)₂SO₄ 5g/L, K₂HPO₄ 2g/L, NaH₂PO₃ 2g/L, NaCl 5g，清水1000mL，112℃灭菌20min；

（2）将4种菌分别接斜面，培养24-36小时，然后各加入到无菌水中，振荡30分钟，待均匀后用血球计数板计数，使每只试管中各种菌的菌数均为10⁸个/mL；

（3）一级培养：将4种菌的菌液分别放入Ⅰ号培养基中进行培养，在180转/分钟摇床于18℃培养32小时，pH值为5-6，使菌数达10⁸个/mL,之后按照权利要求1中所述的单位体积内菌数比例将4种菌剂混合；

（4）二级培养：取混合菌剂10mL，接种于装有已灭菌的100mL培养基Ⅱ中，再置于摇床上，在180转/分钟摇床于18℃培养32小时，pH值为5-6，溶解氧10mg/L条件下培养，之后，吸取经培养基Ⅱ中的混合菌剂培养液10mL，加入盛有100mL培养基Ⅲ的三角瓶中，置于摇床上，在180转/分钟摇床于18℃培养32小时，pH值为5-6，溶解氧10mg/L条件下培养，

依次按上述量和培养方法，将混合菌剂的培养液分别顺序加入培养基Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ进行循环培养，最后加入已经灭菌的水中。

4.根据权利要求3所述的有机物降解复合菌剂的制备方法，其特征在于：上述复合菌剂，每毫升含有效菌的数量为10¹⁰-10¹¹个，微生物脱氢酶活性高达98mgTF/L h。

5.根据权利要求3所述的有机物降解复合菌剂的制备方法，其特征在于：对苯酚类、芳香烃类、多环芳烃类、邻苯二甲酸酯类的降解率可达到100%，对卤代烃类、苯酸类、杂环化合物降解率均在90%以上。

6.  一种有机物降解复合菌剂的应用，其特征在于：有机物降解复合菌剂用于生物处理工艺的方法是：采用物理循环吸附法，将复合菌剂与载体混合，吸附在载体表面或内部形成生物膜，使微生物得以固定。