[发明专利]β-葡聚糖GFPBW1及其制备方法和用途有效
申请号: | 201110321162.1 | 申请日: | 2011-10-20 |
公开(公告)号: | CN103059160A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 丁侃;王滢;方建平;董群 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海药物研究所 |
主分类号: | C08B37/02 | 分类号: | C08B37/02;A61K31/716;A61P35/00;A61P35/02;A61P35/04 |
代理公司: | 北京金信立方知识产权代理有限公司 11225 | 代理人: | 朱梅;徐琳 |
地址: | 201203 上海*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 聚糖 gfpbw1 及其 制备 方法 用途 | ||
1.一种具有如下所示的结构式的β-葡聚糖GFPBW1:
其中,n表示150~750的整数。
2.根据权利要求1所述的GFPBW1,其特征在于,所述β-葡聚糖GFPBW1的平均分子量为3×105Da,分子量范围为1~5×105Da。
3.一种制备如权利要求1所述的β-葡聚糖GFPBW1的方法,包括如下步骤:
(a)用醇溶液浸泡干燥的灰树花子实体,离心,固体物晾干,然后用沸水提取,所得固体残渣用碱溶液浸泡,离心将残渣丢弃,收集上清;调pH至7,再进行透析、浓缩,随后用醇溶液进行沉淀,离心收集沉淀,再经无水乙醇和丙酮依次洗涤,干燥后得棕黄色固体GFPB粗产物;
(b)用适量蒸馏水溶解步骤(a)所得GFPB粗产物,离心除去不溶物,收集上清液并进行DEAE-纤维素柱层析,然后将得到的洗脱组分进行浓缩、透析和干燥以得到β-葡聚糖GFPBW1。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(a)中所述的醇溶液为95%乙醇,优选地用醇溶液浸泡为用95%乙醇浸泡灰树花子实体两周,每周更换乙醇一次。
5.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(a)中所述的沸水提取的条件为:每次加约2倍体积蒸馏水,提取时间为4~6小时,并用苯酚-硫酸法检测提取液中糖含量,提取3~5次,优选提取4次。
6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(a)中所述的碱溶液浸泡的条件为:于4℃下用5%NaOH溶液浸泡两次,每次4小时。
7.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(a)中所述的透析条件为:采用对流动水透析2天。
8.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,步骤(b)中所述DEAE-纤维素柱层析的条件为:先以蒸馏水做洗脱液,然后分别用0.1、0.2、0.3mol/L的氯化钠溶液进行洗脱,再将蒸馏水洗脱部分的组分进行浓缩、透析和冷冻干燥以得到GFPBW1。
9.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(a)取干燥的灰树花子实体,用3倍体积的95%的乙醇浸泡脱脂,每7天为一周期,更换两次,浸泡完毕,离心,将所得固体物置于室温通风处晾干;然后进行提取,3kg原材料每次加30L自来水加热煮沸,提取时间为4~6小时,并用苯酚-硫酸法检测提取液中糖含量,至糖反应不明显,共计提取4次;沸水提取后的固体残渣于4℃下用5%NaOH浸泡两次,每次4小时,合并离心,将残渣丢弃,收集上清;用约2mol/L HCl中和至PH约7,出现浑浊,对流动水透析2天,浓缩,加入3倍体积的95%的乙醇进行沉淀,8000rpm离心收集沉淀,经无水乙醇和丙酮依次洗涤后,于40℃真空干燥,得棕黄色固体GFPB粗产物;
(b)取上述GFPB,加入适量蒸馏水溶解,离心除去不溶物,收集上清液并进行DEAE-纤维素柱层析,其中先以蒸馏水作为洗脱液,然后分别用0.1、0.2和0.3mol/L的氯化钠溶液洗脱,分别收取合并各流分,蒸馏水洗脱部分的组分进行浓缩、透析和冷冻干燥后得到GFPBW1。
10.一种药物组合物,其包含有效剂量范围的权利要求1所述的β-葡聚糖GFPBW1作为有效成分,并且优选地进一步含有药学上可接受的载体及辅料。
11.权利要求1所述的β-葡聚糖GFPBW1在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。
12.根据权利要求11所述的用途,其中所述肿瘤包括组织系统的实体瘤、血液系统癌症、各种原发或继发性恶性肿瘤以及恶性肿瘤的转移。
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