[发明专利]一种化学修饰的生麦芽糖淀粉酶有效
| 申请号： | 201110313483.7 | 申请日： | 2011-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN102409032A | 公开（公告）日： | 2012-04-11 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;陈晟;王磊;吴丹;陈坚;夏泽华 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/26 | 分类号： | C12N9/26;C12N15/56;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人： | 王秀丽 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 化学 修饰 麦芽糖 淀粉酶 | ||
【权利要求书】：
1.一种化学修饰的生麦芽糖淀粉酶，其特征在于其氨基酸序列经过烷基化修饰。
2.权利要求1所述的生麦芽糖淀粉酶，其特征在于所述烷基化修饰用试剂为HNO2。
3.权利要求1或2所述修饰的生麦芽糖淀粉酶的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
(1)生麦芽糖淀粉酶的制备
根据Genebank基因登陆号(NC007333)化学全合成或以此基因设计引物通过聚合链式反应(PCR)进行扩增，然后克隆到质粒pet20b(+)，转化大肠杆菌BL21(DE3)细胞，挑选验证后进行发酵培养，将上清液进行硫酸铵沉淀、离子交换柱纯化，制备生麦芽糖淀粉酶发酵液；
(2)化学修饰剂亚硝酸溶液的制备
制备新鲜的0.2M HNO2溶液，放在4℃冰箱中；
(3)生麦芽糖淀粉酶的化学修饰
将150μL生麦芽糖淀粉酶液加入到170μL的0.1M pH＝6的磷酸缓冲液中，然后加入步骤(1)制备的HNO2至终浓度为10-100mM，将混合好的溶液放在37℃的恒温水浴锅中，反应30min左右。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(2)中所述生麦芽糖淀粉酶的酶液浓度为0.8mg/ml～1.2mg/ml。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(3)中所述HNO2的最佳浓度为45mM。
6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述步骤(1)中亚硝酸钠溶液和盐酸溶液应该当天配制且浓度为0.4M。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江南大学，未经江南大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201110313483.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
