[发明专利]一种双糖化合物及其分离纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种双糖化合物及其分离纯化方法。

背景技术

双糖，是由二分子单糖通过糖苷键形成，水解之后可形成两个单糖分子。天然存在的游离态和具有机能的糖类以哺乳类的乳糖、细菌和昆虫血液等的海藻糖、植物蔗糖为代表，他们作为各种生物体的能量来源，或作为生物体组成的物质原料。

常见的双糖有乳糖、麦芽糖、蔗糖，其中，蔗糖由一分子葡萄糖和一分子果糖形成，进入人体后，被分解为葡萄糖和果糖，从而为人体提供能量。

目前还发现另一个与蔗糖结构类似的双糖化合物，也是由一分子果糖、一分子葡萄糖缩合而成，即，β-吡喃果糖-(1→4)-β-吡喃葡萄糖(Fructopyrano-(1→4)-glucopyranose)，其结构式如下：

式1

它与蔗糖为同分异构体，区别点在于(1)糖苷键的连接位置不同；(2)果糖的存在形式不同，式1化合物为吡喃糖。

该化合物首先在狭叶红景天中发现，有文献报道了该化合物的提取方法：狭叶红景天先用正己烷浸泡后，采用索氏提取器，甲醇提取48小时，回收溶剂后，减压干燥，再用四氯甲烷/甲醇/水进行分离，醇水提取物蒸发至干，最终采用高效液相法，以磷酸水/乙腈/甲醇进行梯度洗脱，分离得到5个化合物，其中得到了式1所示的双糖化合物[Helmut Wiedenfeld，Monika Zych，Waldemar，et al.New compounds from Rhodiola kirilowii.ScientiaPharmaceutica.75，29-34(2007)]。但是，该方法中提取时间长，且需要采用红景天作为原材料，由于红景天价格相对较高，最终导致了该双糖化合物的生产成本偏高，不利于该化合物进一步的药效研究以及在实际生产过程中的应用；并且，该方法中，多处使用毒性强的溶剂(如四氯甲烷、乙腈)，使得该产品的生产和使用存在一定的危险性。

目前还未见该化合物在其他植物中存在的相关报道，也未见制备该化合物标准品的报道。

发明内容

本发明提供了一种高纯度、可用作标准品的β-吡喃果糖-(1→4)-β-吡喃葡萄糖(Fructopyrano-(1→4)-glucopyranose)化合物，还提供了该化合物的分离纯化方法。

本发明提供了一种化合物，其结构式如式1所示，该化合物纯度≥95％。

式1。

进一步地，该化合物纯度≥98％。

本发明还提供了上述化合物的分离纯化方法，它包括如下操作步骤：

(1)取板蓝根粗粉，先用50-70％乙醇V/V提取，浓缩提取液，干燥，所得药材粗提物再用80-95％乙醇V/V提取，浓缩提取液，干燥后，即得板蓝根干浸膏粉末；

(2)取步骤(1)所得板蓝根干浸膏粉末，用硅胶柱分离，二氯甲烷-甲醇(100∶0～1∶1)梯度洗脱，根据薄层色谱检查，合并相同的斑点部分；收集二氯甲烷-甲醇1∶1组分，回收溶剂后，干燥即得式1化合物粗品；

(3)采用制备色谱：取步骤(2)所得式1化合物粗品上制备液相色谱仪，C18色谱柱，流动相为甲醇-水(5-10∶90-95)，经回收溶剂后，即得式1化合物纯品；或，采用重结晶：取步骤(2)所得式1化合物粗品，用65-75％甲醇重结晶后，即得式1化合物纯品。

其中，步骤(1)具体方法为：取板蓝根药材粗粉，先用65-70％乙醇回流提取，合并提取液，回收溶剂，干燥后，再用80-95％V/V乙醇回流提取，过滤，合并提取液，回收溶剂后，干燥，粉碎，即得板蓝根干浸膏粉末。

其中，步骤(3)采用70％甲醇重结晶。

其中，步骤(1)具体方法为：取板蓝根药材粗粉，先用50-70％乙醇回流提取，合并提取液，回收溶剂，干燥后，再用95％乙醇回流提取，过滤，合并提取液，回收溶剂后，干燥，粉碎，即得板蓝根干浸膏粉末。

其中，步骤(3)采用制备色谱，色谱条件如下：

C18色谱柱规格9.4mm×250mm，5μm；柱温30℃；流动相为甲醇∶水＝5∶95；体积流量8ml·min^-1，制备柱柱后分流，分流比1∶5，收集保留时间在1.5～2.5min的组分，回收溶剂，干燥后，重结晶，即得式1化合物纯品。

其中，步骤(1)中所述板蓝根为十字花科植物菘蓝lsatis indigoticaFort.的干燥根。