[发明专利]靶向纳米递释系统及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种DR5mAb(monoclonal antibody against DR5，抗DR5单克隆抗体)介导的靶向纳米递释系统及其制备方法和应用。

背景技术

目前，全世界每年约600万人死于恶性肿瘤。中国现有癌症患者约450万人，死亡率逾30％，造成了严重的社会问题。临床上治疗恶性肿瘤的主要手段仍然是在术后予以全身辅助的化学治疗，但因传统化疗药物普通剂型缺乏靶向性，在杀伤肿瘤细胞的同时也对正常细胞产生毒性，常使患者不能耐受。

以治疗难度大、死亡率高的恶性黑素瘤(malignant melanoma，MM)为例，达卡巴嗪(DTIC)是一种治疗恶性黑色素瘤最有效的药物，化学名称为：5-(3，3-二甲基-1-三氮烯基)-4-酰胺基咪唑枸橼酸盐，在体内分解能放出甲基正离子(CH3)+，为嘌呤生物合成的前体，能干扰嘌呤的生物合成，具有直接细胞毒作用，但是剂型单一，只有普通注射粉针剂，存在毒副作用大、靶向性差、用药顺应性差、稳定性差等缺点，临床用于恶性黑色素瘤的有效率也仅为20％。

死亡受体DR5与目前已知的其他死亡受体CD95、TNFR1、DR3、DR4一样，都属于肿瘤坏死因子受体(TNRF)超家族，都是I型跨膜蛋白，然而死亡受体DR5的独特之处就在于当外来的配体与之结合时，它仅选择性的杀伤肿瘤细胞或者转化细胞，而对机体的正常细胞不具有明显的毒性，极大地降低了其副作用。研究表明，DR5受体高水平地广泛表达于许多肿瘤组织，如肝癌、肺癌、乳腺癌、睾丸癌、卵巢癌、胰腺癌、直肠癌、宫颈癌、子宫癌、恶性黑素瘤、甲状腺癌、咽喉癌、前列腺癌等；而不表达或较少表达于正常的组织细胞中。DR5的激动型抗体(比如DR5mAb)，能特异性地结合DR5，通过细胞内凋亡途径诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常组织细胞毒性很小。因此，可以利用抗DR5单克隆抗体(DR5mAb)对肿瘤进行免疫治疗。目前，这些抗体在临床前期研究已显示出较TRAIL更有效的诱导多种肿瘤细胞系和原代肿瘤细胞凋亡的活性，并能使部分小鼠移植瘤模型的肿瘤消退，部分临床试验研究已取得了可喜的成果。但是，单独使用DR5mAb，容易在体内被清除，影响治疗效果。

经检索国内外数据库和专利数据库，以与DR5具有高亲和性、高特异性、可高效诱导瘤细胞凋亡且对正常细胞无毒副作用的DR5单抗为靶头，偶联载药纳米粒制备具有主动靶向性且可将化疗和免疫治疗有效结合的多功能靶向纳米给药系统尚未见相关文献报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种以本身具有促肿瘤细胞凋亡活性的单抗为靶头的靶向纳米递释系统，该系统是将靶头DR5mAb与载药纳米粒连接而制成的靶向纳米递释系统，是一种有效的药物缓释及靶向治疗系统，其将化疗和免疫治疗有效结合，既提高了药效和特异性，又降低了药物的毒副作用。

此外，还需要提供一种靶向纳米递释系统的制备方法和应用。

为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现：

在本发明的一个方面，提供了一种靶向纳米递释系统，该系统主要由靶头DR5mAb和载药纳米粒连接组成。

优选的，所述载药纳米粒的载体材料为聚乙二醇修饰的聚乳酸。聚乳酸是具有优良生物相容性和生物降解性的聚合物，在人体内代谢的最终产物是水和二氧化碳，中间产物乳酸是体内糖代谢的产物，所以不会在体内积聚，无毒副作用。本发明采用聚乙二醇修饰的聚乳酸，不仅具有前述聚乳酸的优点，还具有长循环的特性，能更有效地将药物输送至肿瘤细胞。

优选的，所述载药纳米粒装载的药物为治疗肿瘤的药物。所述肿瘤包括恶性黑素瘤、肝癌、肺癌、乳腺癌、睾丸癌、卵巢癌、胰腺癌、直肠癌、宫颈癌、子宫癌、甲状腺癌、咽喉癌、或前列腺癌。在本发明的优选实施例中，载药纳米粒以治疗恶性黑素瘤的达卡巴嗪(DTIC)为模型药物。

所述靶向纳米递释系统的粒径为100-200纳米。

在本发明的另一方面，提供了一种上述靶向纳米递释系统的制备方法，包括以下步骤：

将适量药物溶于水，制成内水相；将适量聚乙二醇修饰的聚乳酸溶于有机溶剂，制成油相；将适量人血清白蛋白溶于水，制成外水相；

把内水相加入到油相经超声形成初乳，并将该初乳加入到外水相中超声形成复乳，待有机溶剂挥发后，得到载药纳米粒；

将靶头DR5mAb以化学键偶联的方式连接到载药纳米粒表面，得到靶向纳米递释系统。

优选的，所述内水相与油相的体积比为1∶10，初乳与外水相的体积比为1∶4。