[发明专利]一种铁皮石斛腋芽的快速繁殖技术

权利要求书

1.一种铁皮石斛腋芽的快速繁殖技术，其特征在于：具体步骤如下：

1)腋芽成活生长：当铁皮石斛植株茎节间新长出腋芽长0.5～1.0cm时，用刀片切下完整腋芽，自来水冲洗干净；在超净工作台上，材料先用75％酒精浸泡30s后，0.1％升汞消毒10min，无菌蒸馏水浸洗4次，每次5min，多余水分用无菌滤纸吸干；最后将材料接种在培养基上；培养室温度为22-28℃，以植物培养灯为光源，光照强度2000lx，每天光照12h；培养10天就可见腋芽变粗、伸长，60天后长度可达1.8～2.0cm，长出5片叶；

2)丛生芽的诱导与增殖：在腋芽继续伸长生长的同时，其基部不断有新的丛生芽发生；将腋芽移栽到增殖培养基上进行丛生芽的诱导和增殖；培养室温度22-28℃，以植物培养灯为光源，光照强度2000lx，每天光照12h；培养160天；

3)丛生芽生根及生长成苗：将丛生芽转移到生根培养基上进行生根培养，培养30d，丛生苗基部的气生根发达，根系数量多达20～30条，且在根系上有白色粉末状，瓶苗叶片光亮，茎粗，节多；

4)炼苗移栽：(1)炼苗：将生根瓶苗在移栽前的7～10天放在温室大棚中培养，炼苗；(2)组培苗移栽：组培苗移栽基质为苔鲜、松树皮、木屑与碎石块及粗河沙混合；用甲基托布沣粉剂600倍稀释液将移栽基质喷洒消毒2天后再移苗。

2.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛腋芽的快速繁殖技术，其特征在于：步骤1)中所述的培养基是以MS为基本培养基，分别添加0.3mg/L的NAA、1.0mg/L的6-BA，3％的蔗糖和7g/L的琼脂混合，调节pH值为5.5～6.0，高压灭菌20～25min。

3.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛腋芽的快速繁殖技术，其特征在于：步骤2)所述的增殖培养基配方为MS、1.0mg/L的NAA、2.5mg/L的BA、20％的香蕉汁、3％的蔗糖和7g/L的琼脂混合，调节pH值为5.5～6.0，高压灭菌20～25min。

4.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛腋芽的快速繁殖技术，其特征在于：步骤3)所述的生根培养基为1/2MS、0.2～0.5mg/L的NAA、20％的香蕉汁和2.0‰的活性碳混合。

5.根据权利要求1所述的一种铁皮石斛腋芽的快速繁殖技术，其特征在于：还包括丛生芽无激素培养的驯化：取优质石斛丛生芽簇置于激素含量较高的驯化培养基上培养40d，从中选取生长快的芽簇群；再置于激素含量较低的驯化培养基上培养30d，从中选取生长快的芽簇群；最后置于无激素培养基上培养30d，从中选取生长快且健壮的芽簇；以上培养温度均为22-28℃。

6.权利要求1-5的任意之一所述的铁皮石斛腋芽的快速繁殖技术，其特征在于：所生产的铁皮石斛丛生芽簇可以用于制备无菌干粉。

7.根据权利要求6所述的铁皮石斛无菌干粉，其特征在于：其制备方法为：收集芽簇，去除培养基，用110℃干燥15min，然后80℃、24h烘干，然后用钴60照射灭菌，最后获得铁皮石斛无菌干粉。