[发明专利]磁珠-微孔板法提取核酸试剂盒及其提取核酸方法

权利要求书

1.一种磁珠-微孔板法提取核酸试剂盒，包括盒体和试剂，其特征在于：盒体包括磁力板（1）和可拆卸微孔板（2），可拆卸微孔板（2）由孔架（3）和微孔（4）两部分组成；微孔（4）分单孔或多联孔安置在孔架（3）上，试剂包括磁珠、裂解-结合液、洗涤液A、洗涤液B和洗脱液。

2.根据权利要求1所述磁珠-微孔板法提取核酸试剂盒，其特征在于：所述微孔（4）的制作材料为聚苯乙烯、聚乙烯或聚丙烯。

3.根据权利要求2所述磁珠-微孔板法提取核酸试剂盒，其特征在于：所述微孔（4）的孔底为“U”形或“V”形，微孔（4）的容积为400微升以上。

4.根据权利要求1所述磁珠-微孔板法提取核酸试剂盒，其特征在于：所述磁力板（1）为长方形钕铁錋强磁片，形状、尺寸与可拆卸微孔板（2）底部适配。

5.根据权利要求1所述磁珠-微孔板法提取核酸试剂盒，其特征在于：所述磁珠为SiO₂ 包裹的氧化铁纳米颗粒，所述裂解-结合液为异硫氰酸胍消化液，所述洗涤液A为75%无水乙醇水溶液，所述洗涤液B为无水乙醇，所述洗脱液为电导率≧18微西门子的纯水。

6.一种使用磁珠-微孔板法提取核酸试剂盒提取核酸方法，其特征在于：包括以下步骤：

①将样品与裂解-结合液放入离心管内充分作用后，在4000～10000转/分的转速下，离心5～15分钟；

取上清液50～200微升/孔放入微孔板（1）的微孔（4）中，记录样品对应的孔号，并用8通道微量移液器向微孔（4）加入磁珠5～10微升/孔；

③将微孔板（2）放在微量漩涡振荡器中充分混匀，静置5～10分钟，中间和最后各混匀1～2次，然后将微孔板（2）板底扣入磁力板（1）上，磁吸10～30秒后将磁力板（1）和微孔板（2）一起拿起，甩净孔内液体，管口向下在吸水纸上轻叩以吸干残留液体；

④先分离微孔板（2）和磁力板（1），然后用8通道微量移液器向微孔（4）加入洗涤液A，50～200微升/孔，将微孔板（2）放在微量漩涡振荡器中振荡使磁珠充分悬浮，再将微孔板（2）板底扣入磁力板（1）上，磁吸10～30秒后将磁力板（1）和微孔板（2）一起拿起，甩净孔内液体，然后管口向下在吸水纸上轻叩以吸干残留液体；重复操作此步骤3～5遍；

⑤再次分离微孔板（2）和磁力板（1），然后用8通道微量移液器向微孔（4）加入洗涤液B，50～200微升/孔，将微孔板（2）放在微量漩涡振荡器中振荡使磁珠充分悬浮，再将微孔板（2）板底扣入磁力板（1）上，磁吸10～30秒后将磁力板（1）和微孔板（2）一起拿起，甩净孔内液体，然后管口向下在吸水纸上轻叩以吸干残留液体；

⑥将微孔板（2）移入干燥箱中45～65℃干燥10～20分钟后，用8通道微量移液器向微孔（4）加入洗脱液，30～200微升/孔，将微孔板（2）放在微量漩涡振荡器中振荡使磁珠充分悬浮；

⑦将微孔板（2）移入恒温箱中60～65℃作用10～20分钟，期间振荡混匀2～3次，最后将微孔板（2）板底扣入磁力板（1）上，磁吸10～30秒，上清液即为提取纯化的核酸。