[发明专利]化学合成的HBV 1.2x基因组、表达系统及其构建方法有效
申请号: | 201110273753.6 | 申请日: | 2011-09-15 |
公开(公告)号: | CN102994519A | 公开(公告)日: | 2013-03-27 |
发明(设计)人: | 蔡志明;韩永华;唐爱发;刘宇辰;段永刚;杨锐林;叶艺旺 | 申请(专利权)人: | 蔡志明;韩永华;唐爱发;刘宇辰;段永刚;杨锐林;叶艺旺 |
主分类号: | C12N15/36 | 分类号: | C12N15/36;C12N15/85;C12N15/64;C12Q1/70;C12Q1/68 |
代理公司: | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人: | 向武桥 |
地址: | 518035 广东省深圳市福田区笋岗*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 化学合成 hbv 1.2 基因组 表达 系统 及其 构建 方法 | ||
1.一种化学合成的HBV 1.2x基因组,其特征在于:所述HBV 1.2x基因组的DNA序列为SEQ ID NO:1所示的第一序列。
2.如权利要求1所述的HBV 1.2x基因组,其特征在于:所述HBV 1.2x基因组的DNA序列为SEQ ID NO:1所示的第一序列,所述第一序列由SEQ ID NO:2所示的第二序列改造而成,改造序列对应所述第二序列的1501-3215片段和1-2150片段,所述1501-3215片段的第1909个核苷酸由T突变为C、第1912个核苷酸由C突变为T、第2248个核苷酸由T突变为C,在所述改造序列的两端均加入序列GATATC得到所述第一序列。
3.一种HBV基因型/基因亚型表达系统,其特征在于:包括表达载体及克隆到所述表达载体的如权利要求1或2所述的HBV 1.2x基因组。
4.如权利要求3所述的表达系统,其特征在于:所述表达载体是pcDNA3.1。
5.一种如权利要求3所述的表达系统的构建方法,其特征在于:包括如下步骤:
a)获得HBV 1.2x基因组,所述HBV 1.2x基因组的DNA序列为SEQ ID NO:1所示的序列;
b)将所述HBV 1.2x基因组克隆到真核表达载体;
c)转染人肝癌细胞株HepG2细胞,得到所述表达系统。
6.如权利要求5所述的构建方法,其特征在于:所述真核表达载体为pcDNA3.1。
7.一种HBV基因型/基因亚型快速诊断试剂盒,其特征在于:包括重组质粒,所述重组质粒包括真核表达载体及插入所述真核表达载体的如权利要求1或2所述的HBV 1.2x基因组,所述重组质粒的HBV基因型/基因亚型特异性片段用作阳性对照模板。
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