[发明专利]木糖葡萄球菌A2的高密度培养的培养基及培养方法

权利要求书

1.一种用于木糖葡萄球菌A2的高密度培养的培养基，其特征在于所述培养基的配制包含以下步骤：

首先，分别称取下述原料：0.5重量份乳糖、2重量份示蛋白胨、0.2重量份酵母膏、5重量份香菇汁、7.5重量份NaCl；

然后，将上述原料溶于1000重量份蒸馏水中，搅拌均匀，再使用中和剂将其pH值调节为7.2-7.8，装于三角瓶中，再在温度121℃下灭菌20分钟，即得到所述的培养基。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于所述的香菇汁按以下方法制备：取新鲜香菇500g洗净后切碎，加适量蒸馏水煮沸30min，冷却后于组织捣碎机中捣碎、过滤，滤液经离心后加蒸馏水补足至500mL，得到香菇汁。

3.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于使用中和剂将其pH值调节为7.5。

4.一种木糖葡萄球菌A2的高密度培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.菌种活化：将冷冻保存的木糖葡萄球菌A2(Staphylococcus xylosus A2)接种于MSA培养基斜面，在温度32℃下培养至出现菌落，然后再从斜面上挑取菌苔接入另一个斜面，出现菌落后，重复上面操作，连续转接三次，使得活菌数达到10⁷-10⁸cfu/mL，即得活化菌种；

所述的木糖葡萄球菌A2(Staphylococcus xylosus A2)保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其菌种保藏编号为：CGMCC No.5049；

b.培养基的配制：

首先，分别称取下述原料：0.5重量份乳糖、2重量份示蛋白胨、0.2重量份酵母膏、5重量份香菇汁、7.5重量份NaCl；

然后，将上述原料溶于1000重量份蒸馏水中，搅拌均匀，再使用中和剂将其pH值调节为7.2-7.8，装于三角瓶中，再在温度121℃下灭菌20分钟，这样得到所述的培养基；

c.菌种发酵液的制备：

以使用所述的培养基重量计，将步骤a得到的活化木糖葡萄球菌A2菌种按照培养基重量的2％-4％接种于在步骤b得到的培养基中，在温度30-34℃，摇床速度120-150rpm/min条件下，培养15-20小时得到木糖葡萄球菌A2菌种发酵液；

d.发酵：

以使用的培养基重量计，按照培养基重量的2％-4％将步骤c得到的木糖葡萄球菌A2菌种发酵液接种于在步骤b得到的培养基中，在温度32-35℃下进行震荡摇床发酵17小时；

e.终止发酵：

达到所述发酵时间后，将三角瓶置于4℃冷藏保存，终止发酵，得到木糖葡萄球菌A2活菌数达到3×10⁹cfu/mL以上的木糖葡萄球菌高密度发酵液。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于步骤b中所述的香菇汁按以下方法制备：取新鲜香菇500g洗净后切碎，加适量蒸馏水煮沸30min，冷却后于组织捣碎机中捣碎、过滤，滤液经离心后加蒸馏水补足至500mL，得到香菇汁。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述步骤b中通过添加中和剂调节发酵介质的pH值为7.5；所述步骤b中中和剂是1mol/LNaOH溶液。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述步骤b中的三角瓶中的发酵摇瓶装液量的体积占三角瓶体积的90％。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于所述木糖葡萄球菌A2菌种发酵液接种在步骤b得到的培养基中，在温度32℃，摇瓶速度是130rpm/min条件下，进行发酵17小时。

9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于进一步包括将得到的木糖葡萄球菌A2高密度发酵液在0～4℃下，6000rpm/min条件下离心30分钟，即得到活菌数达到2.06×10¹¹cfu/mL以上的木糖葡萄球菌A2高密度浓缩菌泥。

10.由权利要求4-9任一项所述的方法制备得到的木糖葡萄球菌A2高密度培养物在制备肉制品发酵剂中的应用。