[发明专利]一种猪细小病毒基因工程疫苗的制备方法有效
| 申请号： | 201110239759.1 | 申请日： | 2011-08-19 |
| 公开（公告）号： | CN102319440A | 公开（公告）日： | 2012-01-18 |
| 发明（设计）人： | 黄毓茂;郭春和;刘德辉 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | A61K48/00 | 分类号： | A61K48/00;A61K39/23;A61P31/20 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 林丽明 |
| 地址： | 510642 广*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种猪 细小 病毒 基因工程 疫苗 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.猪细小病毒基因工程疫苗的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）根据猪细小病毒VP2基因序列，构建重组酵母载体pGAPZαA-VP2；
（2）将线性化的重组酵母载体pGAPZαA-VP2电击转化酵母菌株SMD1168，筛选高拷贝的重组酵母工程菌，鉴定；
（3）将鉴定的阳性重组酵母工程菌进行发酵培养，表达猪细小病毒主要结构蛋白VP2；
（4）对表达的结构蛋白进行纯化，加佐剂，制得猪细小病毒基因工程疫苗。
2.根据权利要求1所述猪细小病毒基因工程疫苗的制备方法，其特征在于步骤（2）所述筛选高拷贝的重组酵母工程菌是将线性化的重组酵母载体pGAPZαA-VP2电击转化酵母菌株SMD1168后，分别涂布于含100μL、150μL、200μL Zeocin（100mg/ml）抗性的YPDS平板，于30℃恒温培养箱中倒置避光培养2~3天，待白色的单菌落长出，即筛选出不同Zeocin抗性浓度下的高拷贝重组酵母工程菌。
3.根据权利要求1所述猪细小病毒基因工程疫苗的制备方法，其特征在于所述佐剂为纳米佐剂。
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