[发明专利]抗KU70内化的抗体

说明书

技术领域

本发明涉及物质、组合物和方法，其用于医药中。特别地，本发明涉及包含能够选择性地与Ku蛋白结合的结合部分的物质在医药中的用途，特别是在癌症治疗和诊断中的用途。

背景技术

与治疗相关的是，肿瘤相关抗原应该在癌细胞表面表达，而不在或以明显较低的程度在非转化性的细胞(non-transformed nature)上表达。细胞表面受体是基于抗体的癌症治疗的重要靶标。与抗体结合后，与细胞膜结合的靶抗原可将信号传递到所述细胞中，例如引发凋亡的信号(Shan et al.，1998；Fransson et al.，2006)，或通过受体介导的内吞作用被内化(Liu et al.，2004；Fransson et al.，2004)。与抗体结合后受体的内化为多种治疗性干涉提供了途径，例如，抗体-药偶联物(Wu，2005)或抗体介导的基因治疗(Zhang et al.，2002)。

Ku蛋白是被称为Ku70和Ku80的两个紧密结合的亚单位的异二聚体，通常位于细胞核内，在此它参与负责修复DNA双链断裂(DSB)的非同源末端连接过程。Ku与受损DNA结合并招募DNA依赖性蛋白质激酶(DNA-PKC)的催化亚单位，最终导致DSB修复酶的结合(Lieber et al.，2003)。因此，具有Ku缺失的转基因小鼠在细胞增殖方面显示明显缺陷并且由于DSB修复中的缺陷对电离辐射具有超敏性(Lees-Miller and Meek，2003)。

有研究证明Ku在肿瘤细胞系的表面表达，这就需要对Ku蛋白仅在细胞核中定位的结论进行重新评价。由于Ku在转化细胞质膜中的表达(Prabhakar et al.，1990)似乎参与结合、转移和侵袭(综述参见Muller et al.，2005)，并且最近显示所述侵袭活性由Ku和金属蛋白酶9之间的特异性相互作用介导(Monferran et al.，2004)，因此显示Ku蛋白具有多能性。此外，在胞液中，Ku70与促凋亡蛋白Bax相互作用并阻止其向线粒体迁移，这提示Ku70抑制Bax介导的凋亡(Sawada，M.et al.，2003)。因此，Ku似乎参与肿瘤发展的两个重要特征：促生存和促侵袭过程(Hanahan和Weinberg，2000)，并且已经在多种人细胞系上报道，但是目前仅在原发性多发性骨髓瘤上报道(Muller et al.，2005；Tai et al.，2002)。在人非转化细胞上，仅检测到Ku70在人脐带血管内皮细胞上和单核细胞衍生的巨噬细胞上表达(Ginis et al.，1995；Monferran et al.，2004)。

本发明人惊奇地发现Ku蛋白在与细胞外物质(例如抗体)结合后即被内化。本发明人已经发现受体介导的Ku蛋白内吞作用是快速的(t_1/2为12分钟)且广泛的(100分钟后90％的受体集中到细胞中)，并且可以作为细胞毒性荷载物(payload)进入各种来源的肿瘤细胞的入口。这个惊人的发现提示Ku蛋白的内化特性可以用作向肿瘤细胞递送细胞毒性物质的入口并用于选择性给药和癌症治疗中。

发明内容

因此，在第一方面，本发明提供了包含能够选择性地与Ku蛋白结合的结合部分的物质，其可用于医药中。

所述“物质”包括任何纯化的或分离出的天然实体或化学合成实体，该实体包含一个或多个分子。优选地，所述物质包括一种或多种多核苷酸和/或一种或多种多肽和/或一种或多种化学小分子，其中所述多核苷酸和/或多肽和/或化学小分子可以或不可以通过离子和/或共价引入化学基团进行修饰。

所述“结合部分”包括本发明的物质的一个或多个区域，其能够可逆地和/或不可逆地通过共价键和/或离子间相互作用与另外一个或多个分子的一个或多个区域结合。

所述“选择性结合”包括本发明物质与本文所定义的Ku蛋白的结合比与其它多肽的结合至少强10倍的能力，优选至少强50倍且更优选至少强100倍。优选地，所述物质在生理条件下，例如在体内结合Ku蛋白。

在人细胞中，Ku蛋白是包含分别被称为Ku70和Ku80的70kDa和80kDa亚基的异二聚体，并且负责修复DNA双链断裂(DSB)。所述“Ku蛋白”包括任何天然或合成的蛋白，其包含人Ku蛋白单体的和/或人Ku蛋白单体的同源物和/或直系同源物和/或与本文所定义的人Ku蛋白具有相同结构和/或相同功能的蛋白质和/或其天然变体。