[发明专利]一种基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物的生长因子梯度释放微球支架及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物的生长因子梯度释放微球支架，其特征是通过以下方法制备获得：首先制备PLGA均质微球以及TGF-β3和BMP-2/PLGA微球，分别冻干备用，将冻干的上述微球分散于ddH₂O中制成悬浮液，然后将该悬浮液注入底部设有过滤装置的模具中，采用ddH₂O过滤并调整ddH₂O在模具中的位置，上述微球在模具中堆积，采用无水乙醇烧结上述微球，即形成基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物的生长因子梯度释放微球支架即TGF-β3/ BMP-2梯度释放PLGA微球支架。

2.根据权利要求1所述的基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物的生长因子梯度释放微球支架， 其特征是所述的PLGA均质微球通过以下方法制备获得：按摩尔比为1:0.3-3，取乳酸和羟基乙酸随机聚合生成PLGA，将PLGA溶于二氯甲烷DCM中形成PLGA溶解液，将PLGA溶解液经过均质形成均质聚合物液滴，将该聚合物液滴与聚乙烯醇PVA混匀后，经搅拌，过滤、洗涤和冻干后形成PLGA均质微球，储存备用即可。

3.根据权利要求2所述的基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物的生长因子梯度释放微球支架， 其特征是：其中PLGA溶解液中PLGA的质量百分含量为1-5%，聚合物液滴与聚乙烯醇PVA混匀后形成的混合溶液中PVA的质量百分含量为0.1-1.0%，搅拌时间为3-4h，冻干时间为45-50h，储存温度为-20℃。

4.根据权利要求1所述的基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物的生长因子梯度释放微球支架， 其特征是所述的TGF-β3和BMP-2/PLGA微球通过如下方法制备获得：将TGF-β3溶于牛血清白蛋白BSA中制成TGF-β3原液，将BMP-2溶于牛血清白蛋白BSA中制成BMP-2原液，将PLGA溶于二氯甲烷DCM中形成PLGA溶解液，将TGF-β3原液、BMP-2原液和PLGA溶解液混匀，冰上超声搅拌后形成均匀的乳液，将该乳液经过均质形成均质聚合物液滴，将该聚合物液滴与聚乙烯醇PVA混匀后，经搅拌，过滤、洗涤和冻干后形成TGF-β3/BMP-2-PLGA微球，储存备用即可。

5.根据权利要求4所述的基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物的生长因子梯度释放微球支架， 其特征是：其中TGF-β3原液的最终浓度为1-5μg/mL，BMP-2原液的最终浓度为0.1-0.5μg/mL，PLGA的溶解液中PLGA的质量百分含量为1-5%，TGF-β3原液、BMP-2原液和PLGA溶解液的体积比为1:1:20，冰上超声搅拌时的时间为10-30秒，震动幅度为30-60%；聚合物液滴与聚乙烯醇PVA混匀后形成的溶液中PVA的质量百分含量为0.3-1%，搅拌时间为3-4h，冻干时间为45-50h，储存温度为-20℃。

6.根据权利要求1所述的基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物的生长因子梯度释放微球支架， 其特征是：所述的PLGA均质微球以及TGF-β3和BMP-2/PLGA微球的粒径为50-300μm。

7.根据权利要求1所述的基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物的生长因子梯度释放微球支架， 其特征是：PLGA均质微球以及TGF-β3和BMP-2/PLGA微球的质量比1:1。

8.根据权利要求1所述的基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物的生长因子梯度释放微球支架， 其特征是：采用可编程控制注射泵将该悬浮液注入底部设有过滤装置的模具中，所述的模具为圆柱形玻璃容器，使用输液泵和真空注射泵使ddH₂O在圆柱形玻璃容器中的位置为充满圆柱形玻璃容器下部的1/3-2/3，采用无水乙醇烧结PLGA均质微球以及TGF-β3和BMP-2/PLGA微球0.5-1.5h，形成基于聚乳酸-羟基乙酸共聚物的生长因子梯度释放微球支架即TGF-β3/ BMP-2梯度释放PLGA微球支架，冷冻干燥后，在-20℃储存即可。