[发明专利]前列腺癌靶向基因的寡核苷酸适配体、递释载体、递释系统及其制备方法

权利要求书

1.一种前列腺癌靶向基因的寡核苷酸适配体，其特征在于，该寡核苷酸适配体的组成为：

5′-GGGAGGACGAUGCGGAUCAGCCAUGUUUACGUCACUCCU-(CH₂)₆-S-S-(CH₂)₆-OH-3′，且具有2′-氟修饰。

2.一种前列腺癌靶向基因递释载体，其特征在于，其由聚阳离子高分子材料、亲水性聚合物和权利要求1所述的寡核苷酸适配体为基础，三者以共价方式链接构成，其中，亲水性聚合物与聚阳离子高分子的摩尔比是1～25∶1，所述寡核苷酸适配体与聚阳离子高分子材料的摩尔比为1～5∶1。

3.根据权利要求2所述的前列腺癌靶向基因递释载体，其特征在于，所述亲水性聚合物与聚阳离子高分子的摩尔比是1～4∶1；所述寡核苷酸适配体与聚阳离子高分子材料的摩尔比为3～5∶1。

4.根据权利要求2或3所述的前列腺癌靶向基因递释载体，其特征在于，所述阳离子高分子材料为聚酰胺-胺型树状分支物、聚精氨酸、聚乙烯亚胺或多聚赖氨酸。

5.根据权利要求2或3所述的前列腺癌靶向基因递释载体，其特征在于，所述的亲水性聚合物为聚乙二醇。

6.一种前列腺癌靶向基因递释系统，其特征在于，其是由权利要求2-5任一项所述的前列腺癌靶向基因递释载体与miRNA、siRNA或质粒DNA形成的纳米级基因递释系统，其中，所述聚阳离子高分子材料与miRNA、siRNA或质粒DNA的N/P比是10～15∶1。

7.一种制备权利要求2所述前列腺癌靶向基因递释载体的方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.聚阳离子高分子材料和亲水性聚合物以1∶1～25的摩尔比溶于pH值7.7～8.3的磷酸缓冲液，室温搅拌反应1～2h，生成聚阳离子高分子材料-亲水性聚合物；超滤法除去未反应的亲水性聚合物并更换为pH值6.7～7.3的PBS；

B.权利要求1所述的寡核苷酸适配体溶于PBS中，加入二硫苏糖醇，室温搅拌反应后，除去剩余二硫苏糖醇，生成巯基修饰的寡核苷酸适配体；

C.权利要求1所述的寡核苷酸适配体与聚阳离子高分子材料以摩尔比为1～5∶1，室温下搅拌反应24～36h后生成聚阳离子高分子材料-亲水性聚合物-寡核苷酸适配体，透析除去未反应的寡核苷酸适配体，得到前列腺癌靶向基因递释载体。

8.一种制备权利要求6所述前列腺癌靶向基因递释系统的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将权利要求2-5任一项所述前列腺癌靶向基因递释载体溶于pH值7.4-7.7的磷酸缓冲液中，配制成所需浓度的溶液，将miRNA、siRNA或质粒DNA溶于pH值7.4的PBS中配置成所需浓度溶液，室温下两者等体积混合后，涡旋20-40s后，静置20-40min，制成前列腺癌靶向基因递释系统，其中，所述聚阳离子高分子材料与miRNA、siRNA或质粒DNA的N/P比是10～15∶1。