[发明专利]五味子蛋白及其制备方法和药物用途

说明书

技术领域

本发明属于中药领域，涉及一种从五味子果实及五味子籽中提取获得的蛋白，该蛋白提取物对人体具有增强机体免疫力且具有一定的耐缺氧作用。

背景技术

五味子为木兰科植物五味子【Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.】及华中五味子【Schisandra sphenanthera Rehd.et Wils.】的干燥成熟果实。前者被中国药典2005及2010年版一部收载为五味子(俗称北五味子)，后者收载为南五味子。本草考证，五味子始载于《神农本草经》，列为上品。五味子是传统的药用果实，性温，味酸、甘。具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心之功效。临床用于治疗久咳虚喘、梦遗滑精、遗尿尿频、久泻不止、自汗、盗汗、神经衰弱、肝炎等疾病。

目前，对五味子的研究主要集中在木脂素类成分的研究上，现代化学及药理研究表明，五味子中含有大量木脂素类化学成分，现已从五味子中分离出32种木脂素类化合物单体，其中的7种已发现有明确药理作用，它们的化学结构均属于联苯环辛烯类，药理研究和临床证明：1、具有降低肝炎患者血清谷丙转氨酶水平的作用；2、通过对氧自由基进行清除，从而达到抑制脂质过氧化发生，减轻脂质过氧化物对脑细胞的损伤，对脑细胞有保护作用，使大脑具有明显的抗疲劳和抗缺氧作用，提高记忆力；3、五味子有效成分可增加阈下睡眠剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠只数，延长阈上睡眠剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间，具有明显改善睡眠，镇静安神之功效。为此对五味子中木脂素类成分的提取方法及药理活性(保肝护肝、镇静安神)的文献报道较多，专利涉及广。

发明内容

本发明提供一种五味子蛋白及其制备方法和药物用途。其是将五味子或五味子籽粉碎，经提取，运用膜分离技术或加固体硫酸铵饱和沉淀后透析法，得到高纯度的水溶性蛋白。蛋白含量达50％以上，以该植物蛋白为活性成分或辅料可制备出各种剂型的口服药品及保健食品。本发明采取的技术方案是：

(一)将五味子果实或五味子籽洗净、干燥、粉碎成80～100目细粉；

(二)将粉碎后的物质，加5～15倍量的溶剂于1℃～10℃浸泡提取12～24h，或超声提取0.5～2h，或微波提取0.5～2h，采用相同方法相同溶剂用量提取1～4次，合并提取液；

(三)蛋白的纯化：

将合并的提取液经膜孔径为0.22～0.65μm的中空纤维膜过滤后，再经截留分子量为10～100kDa的中空纤维膜超滤，冻干，得五味子蛋白；

或将合并的提取液，加固体硫酸铵至饱和，1～10℃静止12～24h，离心后取沉淀，以Tris-HCl缓冲液溶解，离心，过滤，取续滤液，经透析，冻干，得五味子蛋白。

本发明还提供用本发明的五味子蛋白以及药学上可接受的载体或赋形剂制备的药物制剂。这些药物制剂选自以下剂型：软胶囊剂、硬胶囊剂、微囊剂、微球剂、滴丸剂、片剂、口服液、散剂、冻干制剂、注射剂等，还可以根据需要制备成缓释或控释制剂。

本发明的五味子仁蛋白，在制备药物制剂时可加入药物可接受的载体，所述药物可接受的载体来自：抗氧剂、鏊合剂、表面活性剂、填充剂、崩解剂、湿润剂、溶剂、缓释材料、肠溶材料、pH调节剂、矫味剂、色素等，常用载体如：甘露糖醇、右旋糖苷、乳糖、葡萄糖、山梨醇、木糖醇、注射用水、注射用乙醇、氯化钠、硅衍生物、纤维素、纤维素衍生物、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、吐温80、琼脂、碳酸钙、聚乙二醇、环糊精、磷脂类材料、滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙等。

根据权利要求3所述的提取制备工艺，其特征在于：提取溶剂是蒸馏水、pH＝7.4的0.01mol/L Tris-HCl缓冲液、pH＝7.4的0.01mol/L磷酸缓冲液、含0.1～0.3mol/LNaCl的pH＝7.4的0.01mol/L Tris-HCl缓冲液中的一种溶剂。

根据权利要求3所述的提取制备工艺，其特征在于：提取方法为溶剂室温浸提、超声提取或微波提取的一种或几种工艺结合。

根据权利要求3所述的提取制备工艺，其特征在于：提取液以步骤三或步骤四的一种进行蛋白的纯化。

本发明以五味子果实及五味子籽为原料，从中提取分离出了五味子蛋白，通过研究表明该蛋白具有增强机体免疫力、抗辐射、抗氧化作用，且具有一定的抗疲劳、耐缺氧、抗炎、镇痛作用。而制备五味子蛋白及利用五味子蛋白的产品至今未见报道和生产。该发明的有益效果填补了制备五味子蛋白的空白并扩展了其在医药领域的应用范围，从而提高了该类制剂在国际市场的竞争力。

附图说明

图1是五味子蛋白不同提取方法的比较图，图中：