[发明专利]一种IgG－IgM聚合物及其聚合方法

权利要求书

1.一种IgG－IgM聚合物，其特征在于：所述IgG－IgM聚合物由IgG和IgM两种免疫球蛋白组成；所述IgG和IgM两种免疫球蛋白中的一者的多糖基团中的羟基氧化后生成的醛基与另一者的氨基结合生成Schiff碱化学键合。

2.一种IgG－IgM聚合物的聚合方法，其特征在于：主要由下列步骤组成：

第一步、透析

将IgM免疫球蛋白溶于pH值为7.2的磷酸盐缓冲液中得到浓度为2mg/ml的IgM免疫球蛋白缓冲液，然后装入透析袋中，在2～8℃条件下，pH值为7.2的磷酸盐缓冲液中透析8～15小时；

第二步、氧化

移出第一步中透析后的IgM免疫球蛋白缓冲液，然后向所述透析后的IgM免疫球蛋白缓冲液中加入与其体积相等的浓度为43mg/ml的过碘酸钠水溶液，使IgM免疫球蛋白中的多糖基团中的羟基氧化反应后生成醛基得到氧化IgM免疫球蛋白水溶液，所述氧化反应的时间为25～35分钟，所述氧化反应的温度条件为2～8℃；

第三步、终止氧化

向第二步得到的氧化IgM免疫球蛋白水溶液中加入与所述过碘酸钠水溶液体积相等的质量浓度为3%的乙二醇水溶液，然后在2～8℃条件下保持25～35分钟以终止所述氧化反应得到终止氧化IgM免疫球蛋白水溶液；

第四步、抗体交联

向第三步得到的终止氧化IgM免疫球蛋白水溶液中加入IgG免疫球蛋白，然后装入透析袋中，置于浓度为0.05mol/l、pH值为9.6的碳酸盐缓冲液中透析8～15小时得到IgG－IgM免疫球蛋白聚合物原液，其中，所述IgM免疫球蛋白和IgG免疫球蛋白两者之间的摩尔比为1:1；

第五步、还原

取出第四步中得到的IgG－IgM免疫球蛋白聚合物原液，向其加入浓度为10mg/ml的硼氢化钠水溶液，于2～8℃条件下进行还原反应1.5～2.5小时得到IgG－IgM聚合物还原液，所述IgG－IgM聚合物原液与所述硼氢化钠水溶液两者之间的体积比为12.5:1；

第六步：提纯

向第五步得到的IgG－IgM聚合物还原液中加入与其体积相等，且pH值为7.6的25℃硫酸铵饱和水溶液，置于2～8℃条件下反应1.5～2.5小时产生沉淀，然后采用离心分离的方式取出该沉淀；

第七步、将第六步得到的沉淀溶于pH值为7.4的0.05mol/l的Tris-HCl缓冲液，稀释至浓度为2mg/ml后装入透析袋中，然后在2～8℃条件下，置于pH值为7.4的0.05mol/l的Tris-HCl缓冲液中透析8～15小时即得IgG－IgM聚合物。

3.根据权利要求2所述的IgG－IgM聚合物的聚合方法，其特征在于：将所述第七步中得到的IgG－IgM聚合物与其体积相等的甘油混合均匀，然后与零下20℃条件下保存。