[发明专利]草莓增殖培养基无效
| 申请号: | 201110096851.7 | 申请日: | 2011-04-19 |
| 公开(公告)号: | CN102224802A | 公开(公告)日: | 2011-10-26 |
| 发明(设计)人: | 毛碧增;冯利;陈丽闽 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
| 地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 草莓 增殖 培养基 | ||
技术领域
本发明涉及一种改良的草莓增殖培养基。
背景技术
硝酸铵是一种强氧化剂,能助长火势,与可燃物粉末混合能发生激烈反应而爆炸;受强烈震动或遇明火也会起爆;急剧加热时也可发生爆炸;其与还原剂、有机物、易燃物如硫、磷或金属粉末等混合可形成爆炸性混合物,是制造炸药的原料。但因其分子中同时存在铵态氮和硝态氮,是生物生长所必须的,因此在草莓组织培养中被广泛应用;但因其存在巨大的安全隐患,市场流通受到国家有关部门的限制,给科研和生产带来不便。
目前现有的草莓增殖培养基为:MS基本培养基+6-苄基腺嘌呤(BA)0.1~0.5mg/l+谷氨酰胺100~200mg/L+糖20~30g/l+琼脂5~9g/l,pH为5.5~6.0。
因此,人们急需一种既能保持原有MS培养基的性能,又能避免使用硝酸铵的新型培养基。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种能避免使用硝酸铵的草莓增殖培养基,采用该草莓增殖培养基能获得大量的草莓组培种苗。
为了解决上述技术问题,本发明提供一种草莓增殖培养基,其为:MSM基本培养基+6-苄基腺嘌呤(BA)0.1~0.5mg/l+谷氨酰胺100~200mg/L+糖20~30g/l+琼脂5~9g/l,pH为5.5~6.0;
MSM基本培养基为:每升MSM基本培养基中含有3984mg的硝酸钾、1361mg的硫酸铵、170mg的磷酸二氢钾、370mg的硫酸镁、440mg的氯化钙、0.83mg的碘化钾、6.2mg的硼酸、22.3mg的硫酸锰、8.6mg的硫酸锌、0.25mg的钼酸钠、0.025mg的硫酸铜、0.025mg的氯化钴、100mg的肌醇、0.1mg的盐酸硫胺素(VB1)、0.5mg的盐酸吡哆醇(VB6)、0.5mg的烟酸(VB3或VPP)、37.3mg的乙二胺四乙酸二钠和27.8mg的硫酸亚铁,其余为蒸馏水,pH为5.5~6.0。
本发明的具体发明过程如下:
1)、计算Murshige和Skoog培养基(MS,1962)中KNO3和NH4NO3浓度,KNO3浓度为0.0188mol/L,NH4NO3浓度为0.0206mol/L,即MS培养基中含有0.0394mol/L的NO3-1和0.0206mol/L的NH4+1。
2)、寻找合适的成分来替代,从而使NO3-1和NH4+1的含量保持不变。这是本发明的关键点所在,因为发明人在发明过程在大量实验的基础上发现:并不是只要NO3-1和NH4+1的浓度同原有MS培养基中的浓度,所得的草莓增殖培养基就具有同等使用效果。只有本发明所特定的成分及含量才能实现本发明的目的。
3)、MS培养基中其他元素以及含量均不变。
4)、配置草莓增殖培养基为:MSM基本培养基+BA 0.1~0.5mg/l+谷氨酰胺100~200mg/L+糖20~30g/l+琼脂5~9g/l,pH为5.5~6.0。
草莓增殖培养基的制作方法具体如下:以改良后的MSM基本培养基作为基础,分别加入6-苄基腺嘌呤(BA)、谷氨酰胺、糖和琼脂,均匀混合,利用1mol/L的KOH或1mol/L的HCl调节pH为5.5~6.0;每1L的MSM基本培养基中加0.1~0.5mg BA、100~200mg谷氨酰胺、20~30g糖和5~9g琼脂。
5)、上述培养基可以用来增殖草莓组培苗。培养条件为:16小时光照,光照强度10~30μmolm-2.s-1,温度为26~28℃;8小时暗培养,温度为20~22℃;上述光照和暗培养交替进行。
本发明的草莓增殖培养基选用了新型的MSM基本培养基,该MSM基本培养基既能保持原有MS基本培养基的性能,又能避免使用硝酸铵;因此具有安全性好的特点,便于规模化推广使用。
附图说明
下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细说明。
图1是4种不同的草莓增殖培养基的使用效果对比图;
A对应MS(即基准对比例),B对应对比例1,C对应对比例2,D对应MSM(即本发明的实施例1)。
具体实施方式
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