[发明专利]一种重组的HSV扩增子载体及其用途有效
| 申请号： | 201110093677.0 | 申请日： | 2011-04-14 |
| 公开（公告）号： | CN102212559A | 公开（公告）日： | 2011-10-12 |
| 发明（设计）人： | 韩志强;孙项东 | 申请（专利权）人： | 郑州威瑞生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/869 | 分类号： | C12N15/869;A61K48/00;A61P35/00;A61P31/22 |
| 代理公司： | 郑州睿信知识产权代理有限公司 41119 | 代理人： | 牛爱周 |
| 地址： | 450000 河南省郑州市高新*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 hsv 扩增 载体 及其 用途 | ||
1.一种重组的HSV扩增子载体，其特征在于，该载体是由分别携带Cre重组酶表达盒和操作性相连元件“loxP-HSV复制元件oriS-包装信号pac-转基因表达盒-LoxP”的两种复制缺陷型腺病毒在共感染细胞内重组而成。
2.根据权利要求1所述的重组的HSV扩增子载体，其特征在于，所述的携带Cre重组酶表达盒的复制缺陷型腺病毒是将操作性相连元件SV40启动子-Cre重组酶编码序列-PolyA元件重组入AD5复制缺陷型腺病毒载体构建而成。
3.根据权利要求1所述的重组的HSV扩增子载体，其特征在于，所述的复制缺陷型腺病毒携带的操作性相连元件的“HSV复制元件oriS-包装信号pac-转基因表达盒”位于2个loxP序列之间，且2个loxP的序列是同向的。
4.根据权利要求1或3所述的重组的HSV扩增子载体，其特征在于，所述的复制元件oriS的序列如SEQ ID NO: 2所示；或所述的复制元件oriS序列通过如下方法获得：MluI酶切BAC-HSV-1-HF获得含末端重复区的BAC-TR，然后NotI酶切BAC-TR获得含oriS及其侧翼序列的片段，再用AgeI酶切前述片段后获得含oriS核心区及其侧翼序列的片段，最后经NcoI酶切获得1.2Kb的含88bp oriS核心区及其侧翼序列的片段作为复制元件oriS的序列；
所述的包装信号pac的序列如SEQ ID NO: 3所示；或所述的包装信号pac通过如下方法获得：MluI酶酶切BAC-HSV-1HF，获得含末端重复区的BAC-TR，然后SacI酶切BAC-TR获得含HSV-1末端重复区“pac”序列的片段；再用HphI酶切前述片段获得含末端重复区“pac”序列的片段；最后BsrBI酶切前一片段后获得含188bp Ub-DR1-Uc结构的片段，作为包装信号pac的序列。
5.根据权利要求1或3所述的重组的HSV扩增子载体，其特征在于，所述的转基因表达盒选自目的基因表达盒，报告基因表达盒，靶基因microRNA表达盒，和靶基因shRNA表达盒。
6.一种如权利要求1所述的重组的HSV扩增子载体的用途，其特征在于，所述的重组的HSV扩增子载体在制备靶向溶肿瘤/抗肿瘤的基因制剂中的应用。
7.一种如权利要求1所述的重组的HSV扩增子载体的用途，其特征在于，所述的重组的HSV扩增子载体用于制备抗HSV感染及HSV感染相关疾病的制剂。
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