[发明专利]一种基于主效QTL连锁标记的大白菜低硝酸盐含量检测方法无效
| 申请号： | 201110090507.7 | 申请日： | 2011-04-12 |
| 公开（公告）号： | CN102181546A | 公开（公告）日： | 2011-09-14 |
| 发明（设计）人： | 张耀伟;杨树秀;王丽丽 | 申请（专利权）人： | 东北农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 150030 黑龙江*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 qtl 连锁 标记 大白菜 硝酸盐 含量 检测 方法 | ||
1.一种基于主效QTL连锁标记的大白菜低硝酸盐含量检测方法，
其特征在于：步骤如下：
步骤一：对A62-2-1大白菜植株的叶片分离提取获得DNA，用大白菜品种A62-2-1的DNA，采用PCR引物TGGGAATCTCCTTTAGCAC和ACAAATCCAGGTCTCATCG进行PCR扩增，扩增产物在6％聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离后，获得大小为300bp的分子标记E18-300；所述6％聚丙烯酰胺凝胶，是指100ml聚丙烯酰胺凝胶溶液中含有5.7克丙烯酰胺和0.3克甲叉双丙烯酰胺；
步骤二：将E18-300用于大白菜品种A62-2-1及其衍生品种或品系的基因型检测，以判断该品种或品系硝酸盐含量；所述大白菜品种A62-2-1衍生品种或品系是指以A62-2-1为亲本，通过常规杂交、或采用组织培养、花药培养、花粉培养、游离小孢子培养、遗传转化、物理诱变和化学化学诱变方法获得的大白菜品种或品系，或采用花药培养、花粉培养、游离小孢子培养获得单倍体，再用秋水仙素处理获得双单倍体；
步骤三：判断如步骤二所述的大白菜品种A62-2-1衍生品种或品系的硝酸盐含量的方法是：将大白菜品种A62-2-1及其衍生品种或品系为母本或父本与其他大白菜品种杂交并繁衍至F2以上，对大白菜植株的叶片分离提取获得DNA，然后用E18-300的PCR引物TGGGAATCTCCTTTAGCAC和ACAAATCCAGGTCTCATCG对这些DNA进行PCR扩增，判断是否具有大白菜品种A62-2-1的低硝酸盐含量主效QTL紧密连锁的分子标记E18-300，来预测该品种或品系硝酸盐含量；只有PCR扩增产物出现唯一一条300bp的E18-300时，则预测该品种或品系具有低硝酸盐含量；PCR扩增产物出现唯一一条290bp的E18-290时，则预测该品种或品系具有高硝酸盐含量；PCR扩增产物同时出现300bp和290bp的E18-300和E18-290时，则预测该品种或品系具有中等硝酸盐含量；所述的低硝酸盐含量是指大白菜硝酸盐含量低于300mg/kg鲜样，所述的中等硝酸盐含量是指大白菜硝酸盐含量介于300mg/kg鲜样到400mg/kg鲜样之间，所述的高硝酸盐含量是指大白菜硝酸盐含量在400mg/kg鲜样以上。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于东北农业大学，未经东北农业大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201110090507.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
