[发明专利]一种BCG免疫抑制剂及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明属于免疫抑制剂制备领域，特别涉及一种BCG免疫抑制剂及其制备方法和用途。

背景技术

支气管哮喘是一种伴有免疫功能紊乱的变态反应性疾病，气道高反应性和气道炎症是其重要病理特征。BCG可以降低哮喘小鼠气道反应性、减轻气道炎症，但严重的副作用也限制了它在临床的应用。斯奇康(BCG-PSN)是BCG经热酚法去除蛋白后提取卡介菌多糖核酸，配以灭菌生理盐水制成的以多糖成分为主的一种非特异免疫调节剂，具有多种免疫调节作用，主要应用与变应性鼻炎等过敏性疾病，在国内已用于临床。

湖南九芝堂公司将BCG组分进行提纯，得到了纯度达90％以上的卡介菌多糖液(BCG-PSA)及卡介菌核酸液(BCG-DNA)，目前BCG免疫制剂斯奇康中所含多糖占88.4％以上，核酸与一些分泌蛋白占11.6％，有许多研究证实多糖是BCG中的有效成分，但是更多的研究表明DNA也是其有效成分。因此采用提纯的BCG-PSA和BCG-DNA重新组合，增加核酸的比例，可能会获得比斯奇康更有效的BCG免疫制剂，且与斯奇康相比，可避免分泌蛋白产生的副作用。

斯奇康在临床上是肌肉注射的方式给药，且3次/周，连续2个月是一个疗程，肌肉注射实施相对比较麻烦，且疗程过长，发挥作用比较慢。且对于新比例的BCG制剂，对其进行最佳剂型的探讨也对临床具有很高的应用价值。

发明内容

为了解决上述现有技术中存在的不足之处，本发明的首要目的在于提供一种新的BCG(卡介菌)免疫抑制剂。

本发明的另一目的在于提供上述BCG免疫抑制剂的制备方法。

本发明的再一目的在于提供上述BCG免疫抑制剂的应用。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种BCG免疫抑制剂，其特征在于：该BCG免疫抑制剂包括以下按质量体积比计的组分：卡介菌多糖多糖267μg/ml和卡介菌核酸67μg/ml。

所述BCG免疫抑制剂为滴鼻剂。

上述的一种BCG免疫抑制剂的制备方法，包括以下操作步骤：取BCG-PSA110μl和BCG-DNA 57μl，加2.833ml生理盐水，混合均匀，灭菌，得到BCG免疫抑制剂。

上述的一种BCG免疫抑制剂在制备治疗哮喘药物中的用途。

所述药物通过滴鼻或注射方式给予，给药最佳剂量是20μg，给药最佳体积是60μl。

本发明与现有技术相比，具有如下突出优点和有益效果：

(1)本发明确定的BCG-PSA与BCG-DNA的最优配比对支气管哮喘小鼠的气道反应性和气道炎症均具有显著效果，明显优于目前临床上所使用的卡介菌多糖核酸(BCG-PSN，商品名：斯奇康)。

(2)本发明的新BCG制剂在动物试验中肌肉注射和麻醉滴鼻均可显著降低哮喘小鼠气道反应性和气道炎症。

附图说明

图1是BCG各干预组对哮喘小鼠气道阻力的影响图，其中RL为气道阻力，Mch指的是乙酰甲胆碱。

图2是BCG各干预组对哮喘小鼠气道炎症的影响图，其中Eos％为嗜酸性粒细胞百分比。

图3是本发明BCG制剂各干预方式对哮喘小鼠气道阻力的影响图。

图4是本发明BCG制剂各干预方式对哮喘小鼠气道炎症的影响图。

具体实施方式

下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。

实施例1不同BCG组分对小鼠哮喘作用的对比实验

一、材料和方法

1、动物及分组：

实验动物：SPF级Balb/c小鼠，雌性，5-6w龄，体重18-20g，广东省实验动物中心提供。分为6组，即正常组(NS对照组)、哮喘组、BCG-PSA组、BCG-DNA组、BCG-PSN组、nBCG-PSN组，每组干预总剂量为20μg，干预体积为200μl，均为首次致敏前7d腹腔注射干预。每组10只小鼠。

2、试剂

BCG-PSA(购于湖南九芝堂公司)：含卡介菌多糖2143.5μg/ml，纯度为质量百分浓度97％。

BCG-DNA(购于湖南九芝堂公司)：含卡介菌核酸926.25μg/ml，纯度为质量百分浓度92％。

BCG-PSN(斯奇康)：由质量百分浓度88.4％的BCG-PSA和质量百分浓度11.6％的BCG-DNA组成，其中含有卡介菌多糖350μg/ml和卡介菌核酸44.9μg/ml。