[发明专利]一种新的宫颈癌细胞株(N-Caski)及其构建方法和应用无效
申请号: | 201110031528.1 | 申请日: | 2011-01-29 |
公开(公告)号: | CN102154214A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 谢幸;周建松;吕卫国;叶枫;程晓东;王新宇;王小云;洪蝶;彭婵娟 | 申请(专利权)人: | 谢幸;浙江大学医学院附属妇产科医院 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/113;C12N15/867;C12Q1/02;C12R1/91 |
代理公司: | 杭州丰禾专利事务所有限公司 33214 | 代理人: | 王从友 |
地址: | 310006*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 宫颈癌 细胞株 caski 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种新的宫颈癌细胞株(N-Caski),其特征在于:该宫颈癌细胞株(N-Caski)保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为:CCTCC NO. C2010128。
2.一种如权利要求1所述的宫颈癌细胞株(N-Caski)的建立方法,其特征在于该方法包括以下步骤:
1)选取针对HPV16型E6/E7共同启动子区的干扰效果较好的SiRNA序列,并设计符合慢病毒载体要求的shRNA序列,shRNA序列的编码链序列如SEQ ID NO:1所示,随从链序列如SEQ ID NO:2所示;
2)构建宫颈癌HPV16 E6/E7启动子基因shRNA重组慢病毒载体,筛选出高滴度慢病毒;
3)转导Caski细胞,抗生素筛选稳转细胞。
3.根据权利要求2所述的一种宫颈癌细胞株(N-Caski)的建立方法,其特征在于载体选用pLenti6/BLOCK-iT-DEST载体。
4.根据权利要求1所述的宫颈癌细胞株(N-Caski)用于作为宫颈癌HPV16 E6/E7癌基因的致病机制的探讨及相关信号通路的研究的细胞模型。
5.根据权利要求1所述的宫颈癌细胞株(N-Caski)用于宫颈癌治疗药物的挑选及验证。
6.shRNA序列,其特征在于:该shRNA序列的编码链序列如SEQ ID NO:1所示,随从链序列如SEQ ID NO:2所示。
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