[发明专利]分离自猿腺病毒血清型19的六邻体、其高变区和使用其的嵌合型腺病毒

权利要求书

1.分离自具有如SEQ ID NO:16所示氨基酸序列的猿腺病毒血清型19的六邻体。

2.编码如权利要求1所述六邻体的DNA。

3.如权利要求2所述的DNA，其具有如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列。

4.具有如SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的高变区(HVR)，其分离自猿腺病毒血清型19。

5.编码如权利要求4所述HVR的DNA。

6.如权利要求5所述的DNA，其具有如SEQ ID NO:20所示核苷酸序列。

7.嵌合型腺病毒，其通过在六邻体中用具有如SEQ ID NO:16所示氨基酸序列的六邻体蛋白或七(7)个或以上其中的连续的残基进行替换而具有非天然氨基酸序列。

8.如权利要求7所述的嵌合型腺病毒，其中所述非天然氨基酸序列为具有如SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的HVR。

9.如权利要求7所述的嵌合型腺病毒，其中所述非天然氨基酸序列为选自下组的HVR片段：SEQ ID NO:21的氨基酸残基11-41；SEQ ID NO:21的氨基酸残基46-52；SEQ ID NO:21的氨基酸残基69-78；SEQ ID NO:21的氨基酸残基106-119；SEQ ID NO:21的氨基酸残基126-138；SEQ ID NO:21的氨基酸残基160-173；以及SEQ ID NO:21的氨基酸残基275-303。

10.如权利要求7所述的嵌合型腺病毒，其为人腺病毒。

11.如权利要求10所述的嵌合型腺病毒，其中所述人腺病毒选自下组：人腺病毒血清型2、3、5、11、24、26、30、34、35、36、41、48、49和50。

12.如权利要求7所述的嵌合型腺病毒，其中所述嵌合型腺病毒还包括治疗性转基因。

13.如权利要求12所述的嵌合型腺病毒，其中所述治疗性转基因选自下组：肿瘤抑制基因、抗原基因、细胞毒素基因、细胞抑制基因、自杀基因、抗血管生成基因和免疫调节基因。

14.如权利要求13所述的嵌合型腺病毒，其中所述肿瘤抑制基因选自下组：p53基因、APC基因、DPC-4/Smad-4基因、BRCA-1基因、BRCA-2基因、WT-1基因、视网膜母细胞瘤基因、MMAC-1基因、腺瘤性结肠息肉病蛋白、DCC(在结肠直肠癌中去除的)基因、MMSC-2基因、NF-1基因、NF-2基因、MTS1基因、CDK4基因和VHL基因；

所述抗原基因为癌胚抗原(CEA)、CD3、CD133、CD44或p53；

所述细胞毒素基因选自编码绿脓杆菌外毒素、蓖麻毒素和白喉毒素的基因；

所述细胞抑制基因选自下组：p21、视网膜母细胞瘤基因、E2F-Rb融合蛋白基因、编码细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的基因和生长终止特异性同源盒(GAX)基因；

所述自杀基因选自编码单纯疱疹病毒胸苷激酶、水痘胸苷激酶、胞嘧啶脱氨酶、嘌呤核苷磷酸化酶、β-内酰胺酶、羧肽酶G2、细胞色素P450-2B1、硝基还原酶、β-葡糖醛酸酶和TRAIL(肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体)的基因；

所述抗血管生成基因选自编码血管内皮生长因子(VEGF)、可溶性血管内皮生长因子受体、血管生成抑制素、内皮抑制素和载脂蛋白(a)三环结构域(LK8)的基因；以及

所述免疫调节基因选自编码CD16、CTLA-4、IL24和GM-CSF的基因。

15.包括如权利要求7所述嵌合型腺病毒的组合物。

16.将治疗性转基因递送至哺乳动物细胞的方法，其包括将权利要求12所述的嵌合型腺病毒引入所述细胞。

17.一种治疗癌症的方法，其包括将权利要求12所述的嵌合型腺病毒施用于个体中。

18.一种制备用于基因治疗的腺病毒载体的方法，其包括将人腺病毒六邻体的七(7)个或以上氨基酸残基替换为具有如SEQ ID NO:16所示氨基酸序列的六邻体蛋白的七(7)个或以上氨基酸残基。

19.包括如权利要求7所述嵌合型腺病毒的分离的宿主细胞。

20.如权利要求19所述的分离的宿主细胞，其中所述分离的宿主细胞为人细胞。