[发明专利]新的美登素生物碱类以及该美登素生物碱类与抗体制备缀合物的用途

权利要求书

1.具有式(I)的化合物：

其中：

●ALK是(C₁-C₆)亚烷基；

●X₁和X₂各自独立地为以下基团之一：-CH=CH-、-CO-、-CONR-、-NRCO-、-COO-、-OCO-、-OCONR-、-NRCOO-、-NRCONR’-、-NR-、-S(O)_n(n=0、1或2)或-O-；

●R和R’独立地为H或(C₁-C₆)烷基；

●i为整数1至40，优选为1至20，更优选为1至10；

●当X₂是-CH=CH-时，j是对应1的整数，当X₂不是-CH=CH-时，j是对应2的整数；

●Z_b是单键、-O-或-NH-，R_b是H或(C₁-C₆)烷基、(C₃-C₇)环烷基、芳基、杂芳基或(C₃-C₇)杂环烷基；或Z_b是单键且R_b是Hal。

2.根据权利要求1的化合物，其中X₂是-CH=CH-或-CONR-，该CO基团键接于–X₁-ALK-基团，R是H或(C₁-C₆)烷基。

3.根据权利要求1或2的化合物，其中-X₁-ALK-是-S-CH₂-。

4.根据权利要求1至3的化合物，其中i是3、4、5、6、7、8、9或10。

5.根据权利要求1至4的化合物，其具有式(II)：

6.化合物，其选自以下化合物：

7.根据前述权利要求任一项的化合物，其中-COZ_bR_b是-COOH、-COO(C₁-C₆)烷基、-COOMe  、-COOCH₂CH=CH₂、基团其中GI表示至少一个诱导基团-NO₂、–Hal或–F。

8.根据前述权利要求任一项的化合物，其形式为碱或盐或所述碱或所述盐的溶剂化物或水合物。

9.制备缀合物的方法，包括以下步骤：

(i)使抗体的任选地添加缓冲液的水溶液与根据权利要求1至8的化合物的溶液接触；

(ii)然后任选地将步骤(i)中形成的缀合物与可能存在于溶液中的未起反应的试剂和任何聚集体分离。

10.根据权利要求9的方法，其中所述反应的温度通常为20至40°C和/或所述反应时间为1至24小时。

11.根据权利要求9至10的方法，其中在步骤(i)或(ii)之后，所述含缀合物的溶液经受超滤和/或渗滤的另外步骤(iii)。

12.根据权利要求9至11的方法，其中所述抗体是特异结合EphA2受体的抗体或其表位结合片段，并且包括至少一个重链和至少一个轻链，其中所述重链包括具有由SEQ ID NOS：1、2、和3表示的氨基酸序列的三个序贯互补决定区，并且其中所述轻链包括具有由SEQ ID NOS：4、5、和6表示的氨基酸序列的三个序贯互补决定区。

13.根据权利要求12的方法，其中所述抗体或所述表位-结合片段是人源化或表面修整的抗体或其表位-结合片段。

14.根据权利要求12的方法，其中所述重链包括由SEQ ID NO：12组成的氨基酸序列，和其中所述轻链包括由SEQ ID NO：14组成的氨基酸序列。

15.根据权利要求12的方法，其中所述重链的组成是氨基酸序列SEQ ID NO：18，和其中所述轻链的组成是氨基酸序列SEQ ID NO：16。