[发明专利]病毒细胞嗜性的识别

权利要求书

1.一种用于识别微RNA或其靶mRNA的体外方法，在病毒为了进入细胞而利用细胞受体和至少一种细胞共受体感染所述细胞的过程中，根据病毒为了进入细胞所利用的细胞共受体对所述微RNA或其靶mRNA的表达进行特异性改变，所述方法包括：

i）在第一病毒利用第一共受体和至少一种其他病毒利用另一种共受体分别感染后，测定表达受体、第一共受体和至少一种其他共受体的待测细胞中的微RNA的表达水平；

ii）识别所述微RNA，相对于未感染细胞中的表达水平，在感染过程中所述微RNA的表达水平受到每种病毒的调节；

iii）比较由此识别的微RNA；

iv）选择微RNA，其表达水平的改变对于共受体的利用是特异性的；

v）可选地识别由此选择的微RNA的靶mRNA。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述待测细胞表达第一共受体和第二共受体，并且感染了为进入所述细胞而利用所述第一共受体的第一病毒和利用所述第二共受体的第二病毒。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述病毒为逆转录病毒。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，所述病毒为HIV病毒。

5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述HIV病毒之一所利用的所述共受体选自由CXCR4、CCR5、CCR3、CCR2、CCR1、CCR4、CCR8、CCR9、CXCR2、STRL33、V28、gpr1、gpr15和ChemR23组成的组。

6.根据权利要求5所述的方法，其中，第一HIV病毒所利用的共受体为CXCR4，而第二HIV病毒所利用的共受体为CCR5。

7.根据权利要求4至6中任一项所述的方法，其中，所述待测细胞为Jurkat-CCR5细胞。

8.一种用于识别感染病毒的患者中的病毒所利用的细胞共受体的体外方法，所述病毒利用细胞受体和至少一种细胞共受体进入细胞，所述方法包括：

i）使可能包含病毒的患者样本与待测细胞接触，所述待测细胞表达所述病毒的细胞受体和所述病毒的至少一种细胞共受体；

ii）测定所述待测细胞中至少一种miRNA和/或miRNA的至少一种靶mRNA的表达水平；

iii）将所述表达水平与预定值进行比较；

iv）由此推断所述病毒是否利用了由待测细胞表达的细胞共受体。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述预定值为未感染的待测细胞中的miRNA或mRNA的表达水平。

10.根据权利要求8或9所述的方法，其中，所述病毒为HIV病毒，并且其中所述待测细胞表达细胞受体CD4。

11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述待测细胞表达细胞共受体，所述细胞共受体选自由CXCR4、CCR5、CCR3、CCR2、CCR1、CCR4、CCR8、CCR9、CXCR2、STRL33、V28、gpr1、gpr15和ChemR23组成的组。

12.根据权利要求10所述的方法，其中，所述待测细胞表达CXCR4。

13.根据权利要求10至12中任一项所述的方法，其中，所述微RNA选自由hsa-miR574-5p、hsa-miR-663、hsa-miR-149*、hsa-miR-575、hsa-miR-638、hsa-miR-181b、hsa-let-7g、hsa-miR-30a、hsa-miR-148a和hsa-miR-9*组成的组。

14.根据权利要求13所述的方法，其中，选自包括hsa-miR574-5p、hsa-miR-663、hsa-miR-149*、hsa-miR-575、hsa-miR-638的组中的至少一种微RNA的表达升高或选自包括hsa-miR-181b、hsa-let-7g、hsa-miR-30a、hsa-miR-148a和hsa-miR-9*的组中的至少一种微RNA的表达降低表明CXCR4是HIV病毒所利用的共受体。

15.根据权利要求8至14中任一项所述的方法，其中，通过RT-PCR或借助于微芯片来测量微RNA的表达水平或mRNA的量。

16.根据权利要求10至15中任一项所述的方法，其中，所述待测细胞选自由Jurkat细胞和Jurkat-CCR5细胞组成的组。