[发明专利]通过检测KRAS突变和RTK表达水平来测定细胞对B-RAF抑制剂治疗的敏感性

说明书

对相关申请的交叉引用

本申请依据35U.S.C.§119(e)要求2009年8月24日提交的美国临时申请流水号61/236466和2010年2月3日提交的61/301149的权益，为了所有目的通过提及而将它们完整收入本文。

发明领域

本发明涉及癌症诊断和治疗，且具体而言，涉及检测诊断和/或预后性的突变或RTK过表达及将所述检测与癌症治疗联系起来。

发明背景

受体酪氨酸激酶(RTK)及其配体是肿瘤细胞增殖、血管发生、和转移的重要调节物。例如，RTK的ErbB家族包括EGFR(HER1和ErbB1)、HER2(neu或ErbB2)、HER3(ErbB3)、和HER4(ErbB4)，并且具有独特的配体结合和信号传导活性。结合ErbB受体的配体包括表皮生长因子(EGF)、转化生长因子a(TGFa)、肝素结合EGF样配体(HB-EGF)、双调蛋白(amphiregulin,AR)、β细胞调节素(betacellulin,BTC)、上皮调节蛋白(epiregulin,EPR)、Epigen(EPG)、调蛋白(heregulin,HRG)、和神经调节蛋白(neuregulin,NRG)。这些配体直接结合EGFR、HER3、或HER4，并且触发多种下游信号传导级联，包括RAS-ERK和PI3K-Akt途径。EGF和其它生长因子和细胞因子，诸如血小板衍生的生长因子(PDGF)经由Ras发信号。Ras突变以其活性的、GTP结合的状态永久地锁定Ras(Wislez,M等,Cancer Drug Discovery and Development:EGFR Signaling Networks in Cancer Therapy,J.D.Haley和WJ.Gullick编,HumanaPress,第89页-第95页,2008)。

MET是另一种RTK，其被其配体肝细胞生长因子(HGF)的活化诱导MET激酶催化活性，这触发酪氨酸Tyr 1234和Tyr 1235的转磷酸化。这两个酪氨酸衔接各种信号转导物，如此启动由MET驱动的生物学活性的全谱。HGF诱导持续的RAS激活，并且如此延长MAPK活性。

K-ras是在多种癌症中经历突变的ras基因之一。密码子12和13处的K-ras基因突变参与肿瘤发生，其导致对p21-ras蛋白，即一种K-ras基因产物的功能修饰，导致将过多的生长信号转移至细胞核以刺激细胞生长和分裂。因此，已经广泛使用K-ras基因突变的鉴定作为癌症诊断，例如胰腺、结肠直肠和非小细胞肺癌中的有用工具，并且研究已经提示了，它可能与一些肿瘤表型有关(Samowitz W S等,Cancer Epidemiol.Biomarkers Prev.9:1193-1197,2000；Andreyev H J等,Br.J.Cancer 85:692-696,2001；及Brink M等,Carcinogenesis24:703-710,2003)。

Ras在致癌性转化和发生中发挥至关重要的作用。致癌性H-、K-、和N-Ras源自限于少数位点（氨基酸12、13、59和61）的点突变。与正常的Ras不同，致癌性ras蛋白缺乏固有的GTP酶活性，并且因此保持组成性活化的(Trahey,M.和McCormick，F.(1987)Science 238:542-5；Tabin,C.J.等(1982)Nature.300:143-9；Taparowsky,E.等(1982)Nature.300:762-5)。人癌症中的致癌性ras参与估计为30%(Almoguera,C.等(1988)Cell.53:549-54)。