[发明专利]通过检测KRAS突变和RTK表达水平来测定细胞对B-RAF抑制剂治疗的敏感性

权利要求书

1.一种鉴定不响应用B-Raf抑制剂治疗的患者的方法，包括测定K-ras突变的存在或缺乏，由此K-ras突变的存在指示患者不会响应所述B-Raf抑制剂治疗。

2.一种测定肿瘤是否会响应用B-Raf抑制剂治疗的方法，包括在所述肿瘤的样品中测定突变体K-ras蛋白或基因的存在，由此突变体K-ras蛋白或基因的存在指示所述肿瘤不会响应用B-Raf抑制剂的治疗。

3.权利要求1的方法，其中所述K-ras突变是激活突变。

4.权利要求1的方法，其中所述K-ras突变是下列至少一项：G12C；G12A；

G12D；G12R；G12S；G12V；G13C；和G13D。

5.权利要求1的方法，其中所述B-Raf抑制剂是特异性B-Raf抑酶抑制剂。

6.权利要求1的方法，其中通过扩增来自所述肿瘤的K-ras核酸，或怀疑含有突变的其片段，并对所述扩增核酸测序来测定K-ras突变的存在。

7.权利要求1的方法，其中通过扩增来自所述肿瘤的K-RAS核酸，或怀疑含有突变的其片段，并比较所述扩增核酸的电泳迁移率与相应的野生型K-ras核酸或片段的电泳迁移率来测定K-ras突变的存在。

8.一种预测患者是否会不响应用特定(specific)B-Raf抑制剂治疗的方法，包括测定所述患者的肿瘤中K-ras突变的存在或缺乏，其中所述K-ras突变在密码子12或密码子13中；且其中若存在K-ras突变，则预测所述患者不响应用特定B-Raf抑制剂的治疗。

9.权利要求1的方法，其中所述测定肿瘤中K-ras突变的存在或缺乏包括扩增来自所述肿瘤的K-ras核酸，并对所述扩增核酸测序。

10.权利要求1的方法，其中所述测定肿瘤中K-ras突变的存在或缺乏包括使用针对突变体K-ras多肽的特异性结合剂来检测所述肿瘤样品中的突变体K-ras多肽。

11.权利要求1的方法，其中所述K-ras突变选自G12S、G12V、G12D、G12A、G12C、G13A、和G13D。

12.可用于权利要求1的方法的试剂盒，其包含对检测K-ras突变体基因或蛋白特异性的材料，和对检测B-Raf突变体基因或蛋白特异性的材料。

13.权利要求12的试剂盒，其进一步包含在鉴定不响应用B-Raf抑制剂治疗的患者中使用的指令。

14.权利要求13的试剂盒，其中所述患者具有肺或结肠直肠癌。

15.一种将乳腺、肺、结肠、卵巢、甲状腺、黑素瘤或胰腺肿瘤分类的方法，包括下列步骤：获得肿瘤样品；检测所述样品中(i)编码B-Raf V600E突变体的基因和(ii)编码k-Ras突变体的基因的表达或活性。

16.权利要求15的方法，其进一步包括基于所述检测步骤的结果将所述肿瘤分类为属于肿瘤亚类；并基于所述分类步骤选择治疗，其中若所述k-RAS突变体在所述肿瘤样品中过表达，则所述治疗与B-Raf V600E特异性抑制剂不同。

17.一种鉴定不响应用B-Raf抑制剂治疗的肿瘤的方法，包括测定受体酪氨酸激酶(RTK)的表达水平，由此所述RTK的异常表达或诱导指示所述患者不会响应所述B-Raf抑制剂治疗，且其中所述肿瘤表达B-RafV600E。

18.权利要求17的方法，其中所述RTK是EGFR或cMET。

19.权利要求18的方法，其进一步包括通过与B-Raf抑制剂组合施用有效量的所述EGFR或cMET的抑制剂来治疗所述肿瘤。

20.权利要求19的方法，其中所述EGFR抑制剂是厄洛替尼(erlotinib)。

21.权利要求20的方法，其中以协同量施用所述组合。

22.权利要求17的方法，其中所述肿瘤类型是结肠或黑素瘤。