[发明专利]纯化vwf以增加非-脂质包封的病毒的去除无效
| 申请号： | 201080039582.4 | 申请日： | 2010-08-20 |
| 公开（公告）号： | CN102482341A | 公开（公告）日： | 2012-05-30 |
| 发明（设计）人： | A·米特雷尔;M·哈斯拉赫尔;C·迈尔 | 申请（专利权）人： | 巴克斯特国际公司;巴克斯特保健股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/755 | 分类号： | C07K14/755;A61K38/36 |
| 代理公司： | 上海市华诚律师事务所 31210 | 代理人： | 傅强国;贾师英 |
| 地址： | 美国伊*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 纯化 vwf 增加 脂质包封 病毒 去除 | ||
1.一种从含蛋白的溶液中去除非-脂质包封的病毒的方法，包括：
在高于所述蛋白的等电点的pH下将所述溶液施加至阳离子交换树脂；以及
使用第一洗涤缓冲液洗涤所述阳离子交换树脂以形成洗脱液，所述第一洗涤缓冲液的pH等于或小于施加至所述阳离子交换树脂的溶液的pH。
2.权利要求1所述的方法，其中施加至所述阳离子交换树脂的溶液比所述蛋白的等电点高至少1个pH单位。
3.一种从含蛋白的溶液中去除非-脂质包封的病毒的方法，包括：
将所述溶液施加至阳离子交换树脂；
在高于施加至所述阳离子交换树脂的溶液的pH的pH下使用第一洗涤缓冲液洗涤所述阳离子交换树脂；以及
使用第二洗涤缓冲液洗涤所述阳离子交换树脂以形成洗脱液，所述第一洗脱液的pH等于或小于所述第一洗涤缓冲液的pH。
4.权利要求3所述的方法，其中所述第一洗涤缓冲液的pH比施加至所述阳离子交换树脂的蛋白的等电点高至少1个pH单位。
5.一种从含蛋白的溶液中去除非-脂质包封的病毒的方法，包括：
在高于所述蛋白的等电点的pH下将所述溶液施加至阳离子交换树脂；和
在高于施加至所述阳离子交换树脂的蛋白的等电点的pH下使用第一洗涤缓冲液洗涤所述阳离子交换树脂；以及
使用第二洗涤缓冲液洗涤所述阳离子交换树脂以形成洗脱液，所述第一洗脱液的pH等于或小于所述第一洗涤缓冲液的pH。
6.权利要求5所述的方法，其中施加至所述阳离子交换树脂的溶液比所述蛋白的等电点高至少1个pH单位。
7.权利要求5所述的方法，其中所述第一洗涤缓冲液的pH比施加至所述阳离子交换树脂的溶液的pH高至少1个pH单位。
8.权利要求2、4、6或7所述的方法，其中所述pH大于7.0。
9.权利要求1-8中任一项所述的方法，其中所述溶液中的蛋白是分子量为至少约150千道尔顿的多肽。
10.权利要求1-9中任一项所述的方法，其中所述阳离子交换树脂具有选自羧甲基(CM)、磺基烷基(SP，SE)、纤维素的硫酸酯、肝素和甲基磺酸根(S)的带负电荷基团。
11.权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述蛋白是凝血蛋白。
12.权利要求11所述的方法，其中所述凝血蛋白选自因子VIII和Von Willebrand因子。
13.一种从含von Willebrand(VWF)的溶液中去除非-脂质包封的病毒的方法，包括：
在高于所述蛋白的等电点的pH下将所述溶液施加至阳离子交换树脂；以及
使用第一洗涤缓冲液洗涤所述阳离子交换树脂以形成洗脱液，所述第一洗涤缓冲液的pH等于或小于施加至所述阳离子交换树脂的溶液的pH。
14.一种从含VWF的溶液中去除非-脂质包封的病毒的方法，包括：
将所述溶液施加至阳离子交换树脂；
在高于施加至所述阳离子交换树脂的溶液的pH的pH下使用第一洗涤缓冲液洗涤所述阳离子交换树脂；以及
使用第二洗涤缓冲液洗涤所述阳离子交换树脂以形成洗脱液，所述第一洗脱液的pH等于或小于所述第一洗涤缓冲液的pH。
15.一种从含VWF的溶液中去除非-脂质包封的病毒的方法，包括：
在高于所述蛋白的等电点的pH下将所述溶液施加至阳离子交换树脂；和
在高于施加至所述阳离子交换树脂的蛋白的等电点的pH下使用第一洗涤缓冲液洗涤所述阳离子交换树脂；以及
使用第二洗涤缓冲液洗涤所述阳离子交换树脂以形成洗脱液，所述第一洗脱液的pH等于或小于所述第一洗涤缓冲液的pH。
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