[发明专利]吡咯啉-5-羧酸还原酶1的突变蛋白

说明书

发明领域

此申请要求在2009年5月26日申请的美国临时申请号61/180,937的优先权利益，为了所有目的将其内容在此以其整体引入作为参考。  本发明涉及吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)的突变蛋白。本发明也涉及测定在受试者中患上与PYCR1有关的年龄相关疾病的倾向的方法，鉴定能够修饰PYCR1的表达的化合物的方法，和治疗患有与PYCR1有关的年龄相关疾病的受试者的方法。本发明还涉及基因改造的动物和修饰PYCR1基因在动物中的表达的方法。

发明背景

皱皮和骨丢失是与衰老有关的典型特征。在一些单成因疾病中，这些变化的过早发生导致患病个体的早衰样外观。作为临床特征，皱皮或皮肤松弛被用作一些有重叠的综合征性疾病的共同特征，这些疾病包括常染色体显性皮肤松弛(ADCL；MIM 123700)、常染色体隐性I型皮肤松弛(ARCL1；MIM 219100)、常染色体隐性II型皮肤松弛(ARCL2；MIM219200，又称皱皮综合征(WSS；MIM 278250))、De Barsy综合征(DBS；MIM 219150)和骨发育异常性老年状皮肤(GO，MIM 231070)。在这些情况下由于广泛的临床重叠经常难以诊断。

发明概述

在第一个方面，本发明提供了PYCR1的突变蛋白，其中在如Swiss-Prot检索号P32322所述的PYCR1的野生型氨基酸序列的序列第4至220位和第222至266位中的至少1个氨基酸残基被突变。

在第二个方面，本发明提供了PYCR1的突变蛋白。突变蛋白包括如Swiss-Prot检索号P32322所述的PYCR1的野生型氨基酸序列的序列第4至266位中的至少1个氨基酸残基的突变，其中所述突变导致突变蛋白与野生型蛋白相比降低的功能或功能的丧失。

在第三个方面，本发明提供了核酸分子。核酸分子包括编码如上所述的突变蛋白的核苷酸序列。

在第四个方面，本发明提供了测定在受试者中患上与吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)有关的年龄相关疾病的倾向的方法。所述方法包括分析从受试者中得到的核酸样品中编码如上所述的突变蛋白的核苷酸序列的存在，其中所述核酸序列的存在指示受试者患上或有风险患上年龄相关疾病的倾向。

在第五个方面，本发明提供了包含编码如上所述的突变蛋白的核苷酸序列的核酸分子在诊断或测定患上与PYCR1有关的年龄相关疾病的倾向中的用途。

在第六个方面，本发明提供了鉴定能够修饰PYCR1基因的表达的化合物的方法。所述方法包括：使目的化合物接触包含编码吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)或其功能片段或突变体的核苷酸序列的核酸分子，并测量编码吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)或其功能片段或突变体的核苷酸序列的表达。

在第七个方面，本发明提供了修饰PYCR1基因在细胞中的表达的方法。所述方法包括将包含编码吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)或其功能片段或功能突变体的核苷酸序列的核酸分子引入细胞。

在第八个方面，本发明提供了治疗患有与PYCR1有关的年龄相关疾病的或具有患上与PYCR1有关的年龄相关疾病的风险的受试者的方法。所述方法包括将包含编码吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)或其功能片段或功能突变体的核苷酸序列的核酸分子引入受试者。

在第九个方面，本发明提供了治疗患有与PYCR1有关的年龄相关疾病的或具有患上与PYCR1有关的年龄相关疾病的风险的受试者的方法。所述方法包括对受试者施用能够修饰PYCR1基因表达的化合物。

在第十个方面，本发明提供了基因改造的动物。所述基因改造的动物包含编码吡咯啉-5-羧酸还原酶1(PYCR1)的核酸，其中所述核酸是失活的。

在第十一个方面，本发明提供了修饰PYCR1基因在动物中的表达的方法。所述方法包括对动物施用能够修饰PYCR1基因表达的化合物。

在第十二个方面，本发明提供了鉴定能够修饰PYCR1基因表达的化合物的方法。所述方法包括对如上所述的基因改造的动物施用目的化合物；并测定所述化合物是否能够修饰PYCR1基因的表达。

在第十三个方面，本发明提供了鉴定能够修饰PYCR1基因表达的化合物的方法。所述方法包括提供包含至少一层活动物皮的分离的皮瓣，所述皮瓣被附着在试验动物上；并应用目的化合物使其接触活动物皮。

发明详述