[发明专利]细胞膜通透性肽

说明书

技术领域

本发明涉及具有细胞膜通透性的新的肽以及含有该肽和亲水性生理活性物质的药物组合物。

背景技术

细胞通过对蛋白质和核酸等亲水性生理活性物质为非通透性的细胞膜而与外界隔离开。没有将这些亲水性生理活性物质运输到细胞内的方法，这成为以细胞内为作用部位的大量亲水性生理活性物质的临床使用的障碍。

报告了几项将这样的细胞非通透性的亲水性生理活性物质运输到细胞内的技术。最一般的方法是使用脂质赋予亲水性生理活性物质以疏水性，从而可以提高细胞膜的通过性。另外，还报告了使用肽性的配基来提高通透性的技术。

具有在不破坏细胞膜的状态下从细胞外向细胞内转移的性质的肽配基被称为细胞膜通透性肽。作为著名的细胞膜通透性肽，有由精氨酸连接而成的寡聚精氨酸、来源于HIV-1病毒的肽Tat(专利文献1)、作为来源于果蝇的肽的穿膜肽(penetratin)(专利文献2)等。除此以外，还报告了以单纯的碱性为特征的肽、以肽的一级结构或二级结构的两亲性为特征的肽、机制不明确的肽等各种肽。关于这些肽，除了其自身的细胞内转移性之外，如上所述以其自身为媒介将所连接的基因等亲水性生理活性物质运输到细胞内部的用途的研究正在盛行。但是，虽然作为研究用试剂有实际成绩，但用于临床应用的较少，正在进行各种摸索，在各种用途中探索能够更高效地转移到细胞内的序列。

在一部分细胞膜通透性肽中，报告了在与亲水性生理活性物质一起经口或经鼻施用的情况下，能够促进亲水性生理活性物质通过粘膜上皮细胞层，从而能够使亲水性生理活性物质以高效率转移到全身循环中的肽。认为并不是所有的细胞膜通透性肽都具有促进从粘膜通透的性质，除了细胞膜通透性之外，该性质还与细胞内的动态、从细胞的脱离等特性有关，只有满足这些条件的一部分细胞膜通透性肽具有促进亲水性生理活性物质的经粘膜吸收的能力，但已被报告具有这样的功能的肽的种类较少。另外，即使是已被报告具有粘膜通透促进性的肽，现状也是其实用化还存在大量课题，例如，即使对于仅以与特定的生理活性物质结合而确认了其效果的肽(专利文献2、3)、或显示了可能以不需要与药物共价结合的形式使用的肽，为了获得充分的效果，也需要大量的细胞膜通透性肽(专利文献4)，等等。

亲水性生理活性物质近年来作为到目前为止占主流的低分子且疏水性的药物以及药物的候选化合物受到关注，显示显著的治疗效果，但由于经粘膜的难吸收性，现状是其施用方法基本限于注射剂，从粘膜吸收亲水性生理活性物质的技术开发在亲水性生理活性物质的非注射剂化的用途中被强烈期待。特别是利用细胞膜通透肽的吸收促进技术与到目前为止被广泛研究的利用表面活性剂的吸收促进技术相比，可期待对粘膜的刺激性低，如果发现能够高效地促进吸收的细胞膜通透肽，则可能成为有希望的技术。

专利文献1：特开平10-33186号公报

专利文献2：特表2002-530059号公报

专利文献3：W02004/037859

专利文献4：特开平10-95738号公报

发明内容

发明所要解决的课题

本发明的课题是提供能够使亲水性生理活性物质转移到细胞内的新的细胞膜通透性肽。

用于解决课题的方法

本发明者们探索具有细胞膜通透性的肽序列，发现了作为目标的具有细胞膜通透性的新的肽序列。即，本发明具有如下构成。

(1)以下(A)～(D)的任一项所述的细胞膜通透性肽：

(A)包含序列号1所示氨基酸序列的肽；

(B)包含在序列号1所示氨基酸序列中替换、缺失、插入或添加了1个或数个碱性氨基酸的氨基酸序列，且具有细胞膜通透性的肽；

(C)包含在序列号1所示氨基酸序列中替换、缺失、插入或添加了1～5个氨基酸的氨基酸序列，且具有细胞膜通透性的肽；

(D)包含用(A)～(C)的任一项所述的肽的反向序列表示的氨基酸序列，在用(A)的反向序列表示的氨基酸序列中替换、缺失、插入或添加了1个或数个碱性氨基酸的氨基酸序列，或者在用(A)的反向序列表示的氨基酸序列中替换、缺失、插入或添加了1～5个氨基酸的氨基酸序列，且具有细胞膜通透性的肽。

(2)根据(1)所述的细胞膜通透性肽，其中，所述(B)的肽包含序列号2～4、9～10、13的任一者所示氨基酸序列。

(3)根据(1)或(2)所述的细胞膜通透性肽，其中，所述(C)的肽包含序列号12、15～30的任一者所示氨基酸序列。