[实用新型]甲型H1N1流感病毒IgM和总抗体检测试纸

说明书

技术领域

本实用新型是涉及生物应用技术领域，特别是涉及一种以胶体金免疫层析法快速检测甲型H1N1流感病毒IgM和总抗体检测试纸。

背景技术

甲型H1N1流感病毒是一种新型的流感病毒，2009年在世界范围内大流行，严重危害人类的健康。其“Ha”指的是血球凝集素(Hemagglutinin)、“Na”指的是神经氨酸酶(Neuraminidase)，甲型流感病毒H有1～15型，有1～9型。H1N1是甲型流感病毒的一种，也是危害最大的病毒之一。在历史上曾造成数次大流行。

目前对甲型H1N1流感检测的主要方法是PCR基因扩增诊断方法，鼻咽试纸抗原诊断方法等。在抗体检测方面，有ELISA等检测方法，但用胶体金类免疫层析技术对甲型H1N1 IgM抗体进行检测尚未有相关报道。

对H1N1 IgM和总抗体抗体检测主要有已下作用：1：对H1N1流感进行辅助诊断。部分H1N1感染的病程较长，可达2周已上，而IgM在5-7天时即可检测出来，并且IgM的存在时间较短，是现症感染的标志，对疾病的治疗有重要的作用；若检测只有IgG抗体而没有IgM抗体，则是既往感染，可排除现症感染。对免疫接种的效果进行评价，从数据上看，目前H1N1接种的有效率约为90％，尚有10％的人需要筛选出来重新接种或用其它方式进行该病的预防。IgM的早期检出和IgG长期存能从两个方面评价疫苗的反应性和有效性。考虑到感染和接种的人群巨大，运用一种快速、简便、有效的抗体检测方法是必要的。

免疫层析胶体金技术是新型的诊断技术，在抗体检测方面已得到较为广泛运用，基本原理如下：利用胶体金标记一种抗原或抗体，在试剂的NC膜上包被相应的配对抗原或抗体，检测时当样品中含相应的特异性抗体或抗原时，胶体金标记颗粒和样品中配体相结合形成复合物，然后在NC膜上层析，再被包被抗原或抗体捕获，形成肉眼可见的检测T线，通过检测线的有无实现对结果的判定。具有操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测和经济实用等优点。

发明内容

本实用新型的目的是提供一种甲型H1N1流感病毒IgM和总抗体检测试纸，具有操作简便、反应快速、敏感性高、特异性强、适合现场检测和经济实用等优点。

本实用新型提供一种甲型H1N1流感病毒IgM和总抗体检测试纸，其特征在于塑料支撑板8一端连接上样垫1，上样垫1的一端紧密压接含有标记H1N1特异性的血球凝集素Ha或H1N1特异性的血球凝集素Ha和神经氨酸酶Na抗原的胶体金垫2，胶体金垫2一端紧密压接硝酸纤维素NC膜3，硝酸纤维素NC膜3包被有相互分离的检测线T15、检测线T26和质控C线，检测线T15为包被在NC膜上的抗人IgM抗体，检测线T26为包被在NC膜上的H1N1特异性的血球凝集素Ha或H1N1特异性的血球凝集素Ha和神经氨酸酶Na抗原，质控C线7为包被在NC膜上的抗H1N1抗体，硝酸纤维素NC膜3的另一端连接吸样垫4形成试纸。

所述的甲型H1N1流感病毒IgM和总抗体检测试纸，其特征在于所述的抗原为H1N1特异性的血球凝集素(Ha)和神经氨酸酶(Na)抗原，抗原可以从H1N1病毒中纯化提取或利用基因工程重组表达。

所述的甲型H1N1流感病毒IgM和总抗体检测试纸，其特征在于所述的上样垫1为玻璃纤维膜或无纺布，吸样垫4由吸水滤纸构成。

所述的甲型H1N1流感病毒IgM和总抗体检测试纸，其特征在于，所述的抗原的包被方法为：以0.01M pH 7.2磷酸盐缓冲液(PBS)将抗人IgM抗体配制成1-2mg/ml的溶液，以0.01M pH 7.2磷酸盐缓冲液(PBS)将抗人H1N1特异性的血球凝集素(Ha)和或神经氨酸酶(Na)抗原配制成0.5-2mg/ml的溶液，用喷膜仪在NC膜下部以1ul/cm的参数进行划线，包被T1、T2线，同时在NC膜上部包被抗H1N1抗体作为C线，划线后将NC膜在干燥间温度20-25℃，湿度小于30％干燥2-5小时。