[发明专利]一种AGT和ACE基因多态性检测特异性引物和液相芯片

说明书

技术领域

本发明属于分子生物学领域，涉及医学和生物技术，具体的是涉及一种AGT和ACE基因多态性检测特异性引物和液相芯片。

背景技术

肾素-血管紧张素-醛固酮(renin-angiotensin system，RAS)是一个激素系统，该系统对血压、血流和内环境调节起着重要的作用，其中，血管紧张素原和血管紧张素转换酶是RAS系统的关键组成部分。

血管紧张素原(Angiotensinogen，AGT)是一种主要由肝脏持续合成并释放入血液循环的α-2球蛋白，AGT的主要功能是作为肾素的底物在调节血压上发挥重要作用。血管紧张素转换酶(Angiotensin-Converting Enzyme，ACE)又称二肽羧基肽酶，ACE的主要作用是将血管紧张素I转化为具有强烈缩血管作用的血管紧张素II。在血循环，AGT被肾素水解生成无活性的血管紧张素I(Ang I，10肽)，后者在肺等器官内皮细胞ACE作用下，从Ang I C端切除两个氨基酸生成具有血管收缩活性的8肽，即血管紧张素II(Ang II)。血管紧张素II除具有刺激血管收缩引起血压升高的作用外，还具有促进醛固酮分泌，引起Na+贮留活性。此外ACE还能够催化有促血管舒张作用的缓激肽水解，ACE活性水平的增高刺激了血管平滑肌细胞的增生和细胞外基质的形成，是ACE基因多态性的重要病理生理基础。

人血管紧张素原(AGT)的基因全长13kb，含5个外显子和4个内含子，位于染色体1q42～43区，AGT的cDNA由1455个核苷酸组成，编码含有485个氨基酸的蛋白质。研究表明，AGT基因中存在某些突变，该突变可引起血浆AGT水平轻度增加，导致Ang I和AngII增加，最终引起血压升高。

本发明目标检测的AGT基因突变位点，如表所示：

  序号  AGT位点突变的内容  简写  1  SEQ ID NO.33的第185位核苷酸，发生T→C突变  T185C  2  SEQ ID NO.34的第75位核苷酸，发生A→G突变  A75G  3  SEQ ID NO.35的第99位核苷酸，发生C→T突变  C99T

血管紧张素转换酶编码基因(ACE)位于17号染色体q23位点，长度为21kb，由26个外显子和25个内含子组成。其中第16内含子存在一段287bp的DNA序列插入(insertion，I)或缺失(deletion，D)，构成ACE基因的I/D多态性(rs1799752)，因此ACE基因可分为3中基因型：缺失纯合子(DD)型、缺失与插入杂合子(ID)型和插入纯合子(II)型。研究表明，ACE基因I/D多态性与血清及组织中ACE浓度密切相关，ACE的D等位基因数目增多与ACE浓度呈正比。目前研究表明，血管紧张素转换酶基因I/D多态性与心脑血管疾病易感性、严重性及预后显著相关。