[发明专利]一种产谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂的基因工程菌及其构建方法有效
| 申请号： | 201010579755.3 | 申请日： | 2010-12-09 |
| 公开（公告）号： | CN102080064A | 公开（公告）日： | 2011-06-01 |
| 发明（设计）人： | 陈坚;堵国成;马腾博;张东旭 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/31;C12N15/70;C12P21/02;C12R1/55 |
| 代理公司： | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人： | 王秀丽 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 谷氨酰胺 转胺酶 活化 蛋白酶 抑制剂 基因工程 及其 构建 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种产谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂的基因工程菌，其特征在于含有吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus；CCTCC M203062）谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂基因。
2.权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于所述谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.权利要求1或2任一所述的基因工程菌，其特征在于所述谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂基因克隆于pET22b(+)上。
4.一种权利要求1所述基因工程菌的构建方法，其特征在于包括如下步骤：
1）根据已知谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂基因N-氨基酸序列及SSI蛋白家族保守区设计引物，进行PCR扩增；
2）对PCR产物进行测序，得到SEQ ID NO.3；
3）根据SEQ ID NO.3设计反向引物，通过反向PCR获得SEQ ID NO.2;
4）根据SEQ ID NO.2序列设计引物获得SEQ ID NO.1；
5）将SEQ ID NO.1克隆与pET22b(+)得到重组质粒pET22b(+)-TAPI；
6）重组质粒pET22b(+)-TAPI转化大肠杆菌BL21（DE3）。
5.权利要求1所述基因工程菌应用于谷氨酰胺转胺酶活化蛋白酶抑制剂的生产。
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