[发明专利]一种高效表达人血清白蛋白的方法无效
| 申请号: | 201010551018.2 | 申请日: | 2010-11-19 |
| 公开(公告)号: | CN101974587A | 公开(公告)日: | 2011-02-16 |
| 发明(设计)人: | 项炜;孙九如;朱威;陈忠 | 申请(专利权)人: | 上海安睿特生物医药科技有限公司 |
| 主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静 |
| 地址: | 201203 上海市浦东新*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 高效 表达 血清 白蛋白 方法 | ||
1.一种重组表达人血清白蛋白的方法,其特征在于,所述方法包括:
(1)提供一种重组酵母细胞,所述酵母细胞中同时包含有:由AOX1启动子驱动的人血清白蛋白表达盒和由GAP启动子驱动的人血清白蛋白表达盒;
(2)培养(1)的重组酵母细胞,从而表达人血清白蛋白。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的由AOX1启动子驱动的人血清白蛋白表达盒和由GAP启动子驱动的人血清白蛋白表达盒分别位于表达载体中。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述的表达载体是:pGAPZα表达载体或pPIC9K表达载体。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的由AOX1启动子驱动的人血清白蛋白表达盒位于pPIC9K表达载体中,所述的由GAP启动子驱动的人血清白蛋白表达盒位于pGAPZα表达载体中。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的人血清白蛋白的表达盒中,从5’至3’依次包括:启动子序列,SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列,白蛋白成熟肽编码序列,翻译终止子序列,这些序列操作性相连。
6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的酵母细胞是毕赤酵母细胞。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法还包括步骤:
(3)分离(纯化)所述的人血清白蛋白。
8.一种重组表达载体的组合,其特征在于,所述组合中包括:
(a)含有由AOX1启动子驱动的人血清白蛋白表达盒的表达载体;和
(b)含有由GAP启动子驱动的人血清白蛋白表达盒的表达载体。
9.一种重组酵母细胞,其特征在于,所述的重组酵母细胞中,包括:由AOX1启动子驱动的人血清白蛋白表达盒和由GAP启动子驱动的人血清白蛋白表达盒。
10.权利要求8所述的重组表达载体组合或权利要求9所述的重组酵母细胞的用途,用于重组表达人血清白蛋白。
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