[发明专利]人源化之单克隆抗体、其氨基酸序列与核苷酸序列与其用途

说明书

【技术领域】

本发明系关于一种抗肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha，TNF-α)的抗体，且特别关于一种具高度中和肿瘤坏死因子α之能力的人源化单克隆抗体与及其可变区之序列。

【背景技术】

肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha，TNF-α)为前发炎细胞激素(pro-inflammatory cytokine)，其主要由包括巨噬细胞与单核球的免疫系统细胞所产生。肿瘤坏死因子α呈现为一同源三聚体(homotrimeric)蛋白质，于其中各次单元最初被转译为一个26kDa之跨膜前驱物蛋白质。在肿瘤坏死因子α转换酶(TNF-converting enzyme，TACE)于接近跨膜区域之位置进行切割后，释出肿瘤坏死因子α之可溶三聚体形式，并经由与效应细胞(effector cell)上之结构区分type I与type II肿瘤坏死因子受器(TNFRI与TNFRII)结合而发挥其活性。

跨膜形式之肿瘤坏死因子α也以其独特之生物功能而被熟知，例如以细胞-细胞接触的方式产生生物毒性活性与B细胞的多细胞株活化(polyclonal B-cell activation)，(Mitoma et al.，2008)。已证明肿瘤坏死因子α对于自体免疫过程具有特定影响，且已成为许多自体免疫疾病的关键治疗标的(Feldmann，2001)。到目前为止，一些抗肿瘤坏死因子α之试剂，如etanercept、adalimumab与infliximab已被美国食品及药物管理局(Food and Drug Administration，FDA)所核准，且皆具有有效中和可溶形式之肿瘤坏死因子α为作用之主要生理机制的能力。然而，这些对抗药对于跨膜形式之肿瘤坏死因子α的结合功效并不同，其可能导致于临床疾病上的不同结果(Taylor，2010)。例如，etanercept对于其中跨膜形式之肿瘤坏死因子α扮演一关键角色的肉芽肿病(granulomatous disease)发病在临床上并无功效(2008，Mitoma)。因此，是否抗肿瘤坏死因子α试剂可与跨膜形式之肿瘤坏死因子α结合对于引起抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC)、补体依赖性细胞毒作用(complement-dependent cytotoxicity，CDC)、细胞凋亡与外至内讯号传递机制而言为必要条件。

鼠科动物之单克隆抗体于临床实施上之主要阻碍为其可能在病患中引起人类抗鼠科动物抗体(human anti-murine antibody，HAMA)反应(Owens and Young，1994；Sandhu，1992；Schroffet al.，1985)。因此，为改善临床使用的效能，已使用基因工程技术以将属于鼠科动物之氨基酸残基取代为人类对应的氨基酸残基，并以减少于病患中之诱发致免疫原性(immunogenicity)的可能性。